Uloga laboratorijske dijagnoze za gljivične bolesti. Laboratorijska dijagnostika mikoza * Moja dermatologija

4402 0

Nažalost, i trenutno je moguće navesti da je dijagnoza gljivičnih bolesti često nerazumne (zone sloma tijela, piling često prihvaćene za "perut", "suhoća". Istovremeno, subjektivna senzacija (svrbež, bol itd.) U žarištu porazu teško nisu tu, a pacijenti su zbog toga duže vrijeme Ne privlačite se stručnjaku.

Promjene noktiju (ružnih, raspadajućeg, starjenih) smatraju se "Oindstrofijom" nakon povrede, smrznutosti itd. Istovremeno (čak i izolirane lezije, slučajno) mogu dovesti do formiranja alergijskog restrukturiranja tijela, utjecati na Krv i limfna posuda i drugi. Pacijenti istovremeno ostaju izvor širenja gljivične infekcije. U vezi s gore navedenim, blagovremena laboratorijska dijagnoza mikoza je blagovremena laboratorijska dijagnoza mikoza, ponašanje ranog liječenja.

Raznolikost kliničkih varijanti gljivičnih bolesti, po mogućnosti se nalaze kod ljudi, kao i karakteristikama mikrobiologije, morfostrukture, imunoloških parametara različitih vrsta (i generale) gljivama dovelo do prisustva značajne količine dijagnostičkih metoda mikoza; Treba napomenuti da se postojeće metode kontinuirano poboljšavaju i (relativno nedavno) imaju neku vrstu pristranosti prema imunološkim i molekularnim genetskim testovima.

S druge strane, kulturno istraživanje i do sada "su u kategoriji standarda blizu zlata" i koriste se za potvrdu sumnjivih rezultata drugih studija; Vjeruje se da kombinacija kulturnih i molekularnih genetskih metoda sa "sumnjivim" u dijagnostičkom planu oblika mikoza (posebno distribuirani, protiv pozadine imunosupresiju bilo kojeg geneze, s porazu od unutrašnjih organa, itd.) Jedan od najpouzdanijih načina za registraciju mychotske prirode procesa.

Međutim, zanemarene "stare" tehnike, posebno bakterioskopiju (posebno prefigura), posebno u svakodnevnoj praksi, mikroskopska "verifikacija" Mikoše u mnogim dermatološkim institucijama širi se u odnosu na ostale testove.

Uzimajući u obzir značajno povećanje broja alergijskih manifestacija na koži (a ponekad i visceralno) - s dugim, hroničnim, povremeno pogoršavajući protok mikoze (kože, nokti itd.), Preporučljivo je proglasiti alergološke testove, omogućujući identifikaciju stupnja osjetljivosti tijela, uključujući kombiniranu gljivičnu bakterijsku infekciju; Ova činjenica može utjecati na specifičnosti liječenja u određenom pacijentu - na primjer, odrediti racionalnu svrhu antimikotike i desenzibilizacije agenata itd.

Tradicionalno, pretpostavljena dijagnoza gljivične bolesti podiže se na temelju kliničkih manifestacija i potvrđuje se laboratorijskim istraživanjima.

U ovom dijelu knjige kratko predstavljamo osnovne metode registracije mikoza (bez obzira na njihovu lokalizaciju), s obzirom na "vrstu istraživanja i materijala uzete". Treba napomenuti da polimorfizam kliničkih manifestacija mikoza (uključujući alergijsku komponentu) uzrokuje da se proučava razni patološki materijal. U isto vrijeme, uspjeh potrage za elementima gljivice ovisi o ispravnom uzmi.

Dakle, periferna zona erytemo-squamous, često figuriranog osipa bogata je miceluma, sporovima gljiva; Na dlakavim površinama lezije, jarred, bjelkasto, obojene, tuljene kose ili njihovi fragmenti se uzimaju - "konoplja" (konoplja "(kose je za kosu preporučljivo kontrolirati lampu za drvo). Određene vještine zahtijevaju ogradu materijala (koristeći iglu) iz tzv. "Crne tačkice" - tamno pohotne konuse u ustima folikula.

U svakodnevnoj praksi se obično istražuju vage kože (sastavlja se struganjem, razmazom, koristeći ljepljivu vrpcu), miješanja modificiranih noktiju, zona subnog sušenja hiperkeratoze, kao i odvojene sluznice. Prema svedočenju, ispljuumu, lavamskom tekućinom, urin (kod pacijenata sa nekadateterizovanim mjehur); Zalijevanje iz mokraćnog ureda, obloge se ne mogu uzimati za istraživanje.

Krv (za istraživanje kulture, kao i IFA, PCR), alkohol i ostale bioise organizma (pleuralni, intra-zglobni, intraperitonealni - uklj. Sakupljeni aspiracijom ili odvodnjem); U nekim su slučajevima (ovisno o aktualnoj dijagnozi), bile, izmet važni, potkožne apsceste razdvojene fistule (posebno dubokim mikosakom). Čak i nekomplicirani dijagnostički testovi zahtijevaju precizno poštivanje sa brojnim uvjetima.

Metode se trenutno primjenjuju za dijagnozu gljivičnih bolesti:

- mikroskopija; Na osnovu otkrivanja patogena u materijalu u okviru studija, uklj. u čovjekovim tkivima;
- Studija kulture s naknadnim mikroskopskim studijama kulture gljivice;
- histološki pregled (G.o. sa dubokim mikosam);
- Imune i molekularne metode.

Mikroskopska dijagnostika

Mikroskopska dijagnostika - postala je moguća iz razdoblja pojave posebne optičke, a u budućnosti elektronskih mikroskopskih tehnika, koje su detaljno proučavali ultrastrukturu gljiva. Istovremeno, dijagnostička vrijednost je otkrivanje elemenata gljivice - tankih granaških niti koji čine gljivične (micelij), zaobljene Bik (sporovi; su reproduktivno "tijelo" gljiva).

Mikroskopska dijagnostika uključuje studiju neobožavanja (maternjih) i obojenih droga. Ova metoda, kao što je napomenuta, najčešće je u dermatološkoj praksi zbog komparativne invalidnosti i niske troškove, ali, s druge strane, nije dovoljno osjetljivo, zahtijeva dijelom slučajevima ponovljenih testova koji potvrđuju druge tehnike.

Dakle, u proučavanju neupadnih droga, pored elemenata gljivice, moguće je otkriti epitelocite, krvne ćelije, razne kontaminacije od vanjsko okruženjeOno što otežava traženje kauzadnog agenta Mikoše, zahtijeva dodatnu "pripremu" materijala - tzv. "Prosvetljenje" svoje (maceracije), koncentracije, razrjeđivanja itd.

Ipak, direktna mikroskopija izvornih lijekova omogućava brzo dijagnosticiranje mikoze, odrediti kojih prehrambenih medija (ako je potreban) materijal treba zaplijeniti, postoji mišljenje da njegov pozitivni rezultat može ostati jedina laboratorijska potvrda Mikose s negativnim odgovorom u kulturi ( A.YU. Sergeev, yu.v. Sergeev, 2003).

Među raznim varijanti "prosvetljenja" lekova, najčešće je dodati materijalu pod proučavanjem ili NAON-om (često se koristi za otkrivanje gljiva u kožnim pahuljicama, kosu, kao i brojne dublju mikrozorske patogene u ispljuumu , biopsats).

Za maceraciju drobljenog i postavljenog na predmetno staklo, vaga se vrše 10-20% rešenje kaustične sode (ili kalijuma) - 1-3 kapi, 10-20 minuta; Lijek je blago presovan sa staklom premaza, za bržu maceraciju - zagrijanu na plamenu dok se ne pojave pare. Pregledavanje prvo pod malim uvećanjem, zatim pod velikim (suvim sistemom).

Pravilno pripremljeni lijek, ne podvrgnut grubi mehaničkim, termičkim i hemijskim efektima, slika je homogene mase koja se sastoji od epitelocita, staničnih propadanja proizvoda gljiva micelija i spora.

Modifikovana kosa postavljena je na klizaču sa 10-30% alkali i tretiraju se istim metodom, ali izdržljiviji - od 20 minuta do 3-4 sata. Sa obilnim sadržajem pigmenta, preporučuje se unaprijed uklanjanje kose 5% vodonik peroksidskog rješenja. Pritisnite vrijednost otkrivanja elemenata gljiva, kao i njihove lokacije u odnosu na kosu.

Priprema materijala iz patološki promenjenih noktiju (bolji tanki prah dobijen iz dubine ognjišta) vrši se slično, ali koristi 30% kaustične sode, obavezno oprezno grijanje na plamen u lakim pare i izloženosti za 1C (ponekad do nekoliko sati). Pripreme koje se tretiraju alkalijem ne smiju se čuvati više od 1,5 metra zbog njihove "štete" (kristalizacije reagensa, smanjenje dijagnostičke pouzdanosti mikroskopskog uzorka utvrđene).

Umjesto sa Con ili podne, može se koristiti: a) rješenje mješavine policajaca sa 15% dmso; b) mješavina fenola (2 dijela) sa hloralhidratom (2 dijela) i mliječne kiseline (1 dio); c) CACUPLEOROVELA WHITE, ima afinitete za higi-bunar i celulozu; Za studiju potreban je luminescentni mikroskop (postoji plavi ili zeleni sjaj koji ovisi o apsitanskom filtru). U studiji alkoholnih pića (sa sumnjom na kriptokokozu) često se koristilo slikanje automobilom.

Kulag V.V., Romanenko I.M., Afonn S.L., Kulag S.M.

Osnova za dijagnostiku gljivičnih bolesti je mikroskopsko istraživanje lijekova pripremljenih od pogođene kože i noktiju. Međutim, mikroskopska slika u različitim vrstama mikoza je slična: spore gljivica i razgranati septički micelijum s promjerom 4-7mkm vidljivi su u kožnim vagama i noktima. Stoga se rod i vrsta gljivice u većini slučajeva ne mogu odrediti na mikroskopskoj slici u vagi na koži ili u struganju iz nokta. Da biste identificirali patogen, usjevi se izvode na hranjivim medijima, najčešće na Saburo srijedu.

Epidermofilacija.Pohodni sloj kože je pogođen, najčešće se zaustavlja i nokti donjih ekstremiteta. Kosa nikad nije zadivljena. Žute mrlje ili bendovi pojavljuju se na noktima, a zatim hiperkeratoza (zadebljanje noktiju) razvija, njihova deformacija i uništavanje. Na zaustavljanju kože nalazi se ploča za piling ploča i interplalne nabore, crvenilo. Ponekad se formiraju mjehurići, promjeri, pukotine. Bolest prati svrbež, paljenje, bol.

Sa mikroskopskim pregledom ostataka, gumama, gumama guma određeni su malim oslikanim nitima micelija s promjerom 3-5 mm, dijelom niti padaju u okrugle i pravokutne sporove.

Trikhophisia.Ovo je gljivična kožna bolest i njegovi dodaci posebnom tendencijom da joj udari kosu [lat. trichos. Kosa +. phyton. Fungus]. Na vlasištu se pojavljuju brojne lezije sa promjerom oko 1,5 cm. Koža na njima je edem, hiperemična, prekrivena vagama. Kosa u žarištima je zavijena na nivou 2-3 mm iznad površine kože, od gde i naziva "žica liše".

Mikroskopski pregled otkriva karakterističnu karakteristiku gljivica Thejofiton tipa - aranžman njihovog spora sa lancima. Ovisno o svojstvima gljiva razlikuju:

Endothrix (patogen površinskog trico). Gljive rastu unutar kose dramatično mijenjaju svoju strukturu. Sva kosa je punjena (naduvana) paralelnim redovi lanca koji se sastoje od velikog zaobljenog ili kvadratnog spora;

Ectothrix (patogender dubokog trico), u kojoj se kosa svlada u slučaju malih ili velikih argumenata koji se nalaze uz osovine osi.

Favus - Persh.Kosa i koža su pogođeni, manje često - nokti. Kosa postaje suptilna, dosadna, "plivanje", poput drevnih perika, ali nije lepršana. Za leziju kože, izgled žuto-sive kore (zaklopke) s podignutim, poput sauta, ivica.

Sa mikroskopskim pregledom otkrivaju se mjehurići zraka unutar pogođene kose.

Microsporia.Kožu i kosu su pogođeni. U lezijama lezije, kosa je okrugla na 6-8 mm iznad površine kože. Bjelkasti poklopci su vidljivi oko preostale konoplje.



Uz mikroskopski pregled pogođene kose, sporovi su vidljivi, koji se nalaze oko i unutar kose mozaika (nasumično). Vrlo su mali (1-3 mm), otuda i ime bolesti. Dijagnoza mikrosporusa pomaže karakterističnoj luminomectcentnoj grudi.

Kada se nađu mikroskopski pregled, zaobljene obvezujuće ćelije često u obliku grozda grožđa.

Duboko (plijesni) mikoze.Češće se smatra profesionalnim bolestima u preduzećima za proizvodnju antibiotika, u poljoprivrednim radnicima u kontaktu sa pljuskitnim zrnom, sijenom, kompostima itd. Uzrodni agent penicilioze (gljiva gljiva) ima grubo, širok, septički micelij koji završava četkom. Uzrodni agent Mulkosa ima široki nedovršeni micelij koji završava vrećicom sa sporovima. Uzrodni agent Aspergilleza (oblikovani kalup) često se nalazi na plijesanskom voću, hljeb. Ima grub septički micelij koji završava ekspanzijom iz koje se mogu podsjetiti niti s sporovima nalik na vodu.

Aktinomikoza. Uzrokovane različitim vrstama blistavih gljivica. Karakterizira ga formiranje na koži, sluzokom membranama i unutrašnjim organima guste infiltrate, sklone isporučenom i izgledu fistula. Mala žuta zrna s karakterističnom blistavom rubom vidljive su u oči u kanalizaciji fistula - DUBBY Actinomiceta. Pripreme za mikroskopiju pripremaju se od odvojene fistule i ispljunja.

Sa malim porastom dubberne blistave gljivice imaju vrstu žućkastih formacija zaobljenog oblika sa laganom amorfnom sredinom i tamnijem bojom oko rubova. Sa velikim povećanjem središta Duba određuju se niti micelijunila, a u periferiji - lagano natečeno. Kada slikate na gramu filamenta micelijum r + i Kolkovka G-.

Laboratorijska dijagnoza gljivičnih bolesti zasniva se na otkrivanju gljiva i određivanju vrste i vrste. Sastoji se od dvije glavne faze: mikroskopske i kulturne studije.

Mikroskopski pregled

Mikroskopski pregled je prva i važna veza koja vam omogućava da potvrdite preliminarnu dijagnozu.

Uspjeh mikroskopske studije u velikoj mjeri ovisi o pravilnoj ogradi patološkog materijala. Za mikroskopsku studiju potrebno je odabrati kosu koja ima beskonačne znakove gljive lezije (dosadno, slomljene, zadebljane). Promijenjeno u izgled dlake uklonite epilatorske pincete. Da biste otkrili jednu zadivljenu kosu s mikrosporijom, možete koristiti fluorescentnu lampu s filtrom drveta (zelenkasto-plavi sjaj).

U odabiru začuđene kose možete koristiti niz dodatnih funkcija. Kosa pogođena mikroporumima, u bazi, ima sivi slučaj spora od outfit-a. U hroničnom trostrupnosti u debljini vaga, kratka siva su zakrivljena u obliku "zareza" i "ispitivački znakovi" pogođene kose, kao i "crne tačkice" (zadebljano crno, rođeno u ustima folikula začućene kose) . Sa infiltrativom arrogontnom triothetijom za mikroskopsku studiju, osim zahvaćene kose, možete koristiti gnoj i kore iz fokusa lezije.

Sa žarišta lezije kože za vrijeme microsporia, tricochy i mikoza ingvinalnih nabora pahuljica, potrebno je strugati iz periferne zone lezije, gdje je gljivica u više. Puhanje kose kože s vagama kože.

U istraživanju zadivljene kose tokom mikrosporive i tricochy-a skreće se pažnja na osobitosti rasporeda spora (unutar ili izvan kose) i njihovoj veličini. Ovi podaci omogućavaju u nekim slučajevima da razjasni dijagnozu, klinički oblik Mikosa i epidemiologija.

Uz obrazac za međusobnu obrazac Mikosa Stop za mikroskopsku istraživanje koristi kožne pahuljice i fragmente mackerskih sogova. Odjeljak za nokte koji treba poduzeti za mikroskopski pregled ovisi o obliku onyhomikoze. Sa površinskim oblikom, morate napraviti struganje sa površine ploče za nokte.

Sa najčešćim distalnim bočnim oblikom, struganjem iz kreveta za nokte, od tanjira (subnumber hiperkeratoze) sa dijelom rezanja promijenjena ploča za nokte. Uz proksimalni podstavljeni obrazac za ogradu materijala koriste se posebne metode (prozori bušilice s Bormerom, biopsijom za nokte).

S skvamoznim hiperkeratotskim oblikom Mikosa zaustavljaju vagu za struganje sa površine plantara. Uz obrazac za pražnjenje mikoose, gumama mjehurića su režene za studiju.

Oprema za pripremu materijala za mikroskopsku istraživanje kose . Mali pad od 30% konte i predviđene kose nalazi se na površinskoj staklu staklene i igle za usisavanje. Pad kose malo se zagrijava preko plamena alkohola dok se parom ne pojavi iznad površine tečnosti ili gubitka oboda kristala duž ruba kapke alkalije. Nakon prekrivanja natkrivenog stakla, višak alkalija uklanja se filternim papirom. Lijek se ispituje prvo pod malim, a zatim pod velikim (X 400) povećanjem mikroskopa.

Vaga kože i noktiju . Tanki pahuljići za nokte za mikroskopske studije postavljaju se na slajd u kapljici od 30% CON-a i zagrijane dodavanjem alkalije tokom isparavanja. Hlađeni neoštećeni lijek prekriven je staklom premaza i mikroskopijom.

Gusta koža i pahuljići za nokte postavljeni su u cijevi centrifuge i izlijevaju se s nekoliko kapi od 30% con. Tube se zagrijava da kuha i ode 20-30 minuta. Komad omekšanog materijala sa staklenim štapom prenosi se na tobogan, pritisnuo utakmicu prije pojave "oblaka", nakon čega je mikroskopija.

Pus . Pad gljive pomiješa se s padom alkohola na pola s glicerinom i istražuje se u izvornom pripremu.

Kulturna dijagnoza

Kulturna dijagnostika se vrši za konačno pojašnjenje dijagnoze i pojašnjenja epidemiologije. Uključuje proizvodnju kulture gljiva sa naknadnim mikroskopskim pregledom.

Zaverena kosa, vage (koža i nok), mjehuriće gume ili maca padaju na umjetni hranljivi sastojak. U izgledu divovskih kolonija na Petrionu posuđe možete napraviti ideju o putu patogena (mikrosporum, trihophyton, epidermophyton), njegov oblik (L. Canis ili Ferrugineum, T. Violaceum, virlukosum ili gipseum). Konačno usavršavanje roda i vrste gljivice moguće je samo na temelju mikroskopske studije dobijene kulture.

Laboratorijska dijagnostika površinske kandidijaza

Za laboratorijska istraživanja Potreban je svježi materijal na gljivama poput kvasca. Za mikroskopski pregled, ovisno o kliničkim manifestacijama i lokalizaciji lezija, mogu se uzimati kožne pahuljice, ostaviti s noktima, pad gnoja iz valjka za nokte, bjelkaste racije od pogođenih područja sluznice i vanjskog genitalija Organi, zidovi vagine, strugajući sluznici membrane školjke uretre, kao i pere s crvenom obrubom usana, zadivljene površine kože velikih i malih nabora.

Ovisno o mjestu poraza i prirode kliničkih manifestacija, materijal za studiju uzima pamučni obloge, skalpel, petlja itd. Kože i pahuljice za nokte, komadići epiderme i padina sluznice su prethodno liječeni sa 30% con. Patološki materijal se istražuje u neobojanim ili obojenim drogama.

U prvom slučaju materijal se miješa sa jednakom količinom alkohola sa glicerinom. Kada se slika u pogledu grama, ćelija kvasca i pseudomytelines izgleda tamno ljubičasto, uz cylu-nielsen - plavu, a na Romanovskom-Gymn - ružičasto-ljubičastom. Istovremeno, karakteristična karakteristika kvasce će se šaliti - otkriće oblika "sata". Uzimanje materijala iz sluznice usmene šupljine, genitalnih organa, od kože crvene granice usna, iz uglova usta, iz kože velikih i malih nabora vrši se sa sterilnim tamponom. Tampon nakon uzimanja materijala postavlja se u drugu sterilnu cijev sa tečnim gnojem. Ispitna cijev sa tamponom šalje se u mikrobiološku laboratoriju. Izdanje čiste kulture gljiva nalik na kvascu roda Candida izvedena je prema općenito prihvaćenoj mikrobiološkoj tehnici.

Laboratorijska dijagnostika mikoza

Uzimanje materijala za laboratorijske istraživanja na gljivici.

1. SOST 42-21-2-854: Narudžba br. 222/80 od 27.06.00
2. Uspostavljanje: pincete, klizne čaše, škare, kašika Folkmana.
4. Prikaži: Gljivične bolesti.
5. Predmeti: Ne.

Priprema proceduralnog ureda:

Promjena rješenja.

Kuhar
-1% RR hlor za veterinar
-3% RR hlor - za dezinfekciju preljeva i pinceta
- Čišćenje RR (156 ml. Vodonik Peroksid + 5 g. Prašak za deterdžent + 839 ml. Disklasifikovana voda) - za obradu pinceta
- 6% r-R Perove Vodonik - za preradu rukavica.

Algoritam za obavljanje manipulacije.

Trebate uzeti pincetu, čašu, kašiku Folkmana, škara;
- Pozovite pacijenta na dresing;
- pacijent sjedi na stolici ili kauču;
- M / s stojeći.

Tehnika izvršenja:

Od fokusa lezije do pinceta da preuzmu vagu kože i kose;
- Uzeti materijal stavite klizanje i zatvorite se s drugom staklom veličine.
- oprati ruke sa sapunom;
- Pošaljite materijal za slanje u laboratoriju.

Zbirka materijala

Uzimanje noktiju na istraživanju.

Uzmi škare i slajdove;
- odseci komad sa slobodne ivice nokta;
- uzete materijal za pokrivanje s drugom staklom veličine;

Škare i pincete namočite u 3% rešenju formalina.





Ispravna kolekcija materijala pogođenih noktiju ključ je uspješnog mikrobiološkog istraživanja. Uzimajući materijal, ne uhvate uvijek u noktima koja sadrže održive gljive. Ne-vizuelne gljive u kulturi, naravno, neće se povećati, a ne mogu se instalirati.

Parcela noktiju, koja se mora poduzeti, određuje se obliku onkromikozom.

Dakle, sa površinskim oblikom onkromikoze, škurice treba napraviti od površine ploče za nokte.

Sa najčešćim distalnim podcasnim obrascem, najodžnjim gljivama nalaze se ispod ploče za nokte. Materijal koji je usmjeren na studiju trebao bi sadržavati ne samo obrezivanje ploče za nokte, već i struganje iz kreveta za nokti, ispod tanjura.

Pored toga, treba zarobiti područja nepromijenjenog nokta, jer se najaktivniji gljive nalaze na granici između njih i pogođene na noktima.

Uz proksimalni podcast oblik materijal je težak. U tim slučajevima ponekad, posebno ako će histološki pregled voditi ili diferencijalna dijagnoza, Uzmite biopsiju noktiju, povremeno koristite Bormshinu.

Sa Paronichima čine vagu iz proksimalnog valjka i iz njega.

U svim slučajevima, kako bi se izbjegla bakterijska kontaminacija, uzorak treba tretirati etilnim alkoholom.

Mikroskopski pregled

Mikroskopsko istraživanje patološkog materijala na gljivama proizvodi se u matičnim i slikanim drogama.

Za pripremu neobojenih lijekova, rezultirajući materijal brusi sa skalpelom ili iglom za usisavanje i postavlja se na sredinu kliznog stakla. Za jasniju identifikaciju elemenata gljivice, izrađuje se prosvjetljenje (maceracija) materijala. U tu svrhu, pribjegava se pomoći različitih tvari, najčešće s jelenjem Alkalija (Con, Naoh), koji rastvaraju epidermalne pahuljice, sluz, gljive, prosvetljuju pigment kose i čime se gljive na taj način na taj način na taj način učini da su gljive dostupne za istraživanje.

Na omekšanoj koži ili pahuljica za nokte, koje su postavljene na sredini kliznog stakla, uzrok 1-3 kapi od 20 - 30% Con (NaOH) rješenje. Materijal u studiji u kapi alkalije lagano se zagrijava preko plamena alkohola do osjetljivih bijelih oboda iz kristala alkalije na periferiji pada. Ne bi trebalo biti zagrijavo do ključanja. Nakon zagrevanja, pad je prekriven staklom premaza, izbjegavajući mjehuriće zraka.

R. AIRABIAN i G. I. Gorshkova (1995) preporučuju prosvijetljeni i prekriveni staklom premaza i kose za 5 - 10 min, a ploče za nokte - za 30 - 40 minuta do mikroskopike.

Prosvetljenje droga može se izvesti bez grijanja, za to su ostavljene u 20% rješenju CON-a za 30-60 minuta ili koriste druge metode prosvjetljenja patološkog materijala: hloralctophenol prema Amanu; laktofenol; Rješenje koje sadrži 15% dimetil sulfoksida i con u vodi. Dobri rezultati dobivaju se nakon prosvetljenja ploča za nokte postavljene u 5% rešenja CON-a za 24 sata, grijanje u ovom slučaju nije potrebno.

Mikroskopsko istraživanje proizvodi se na konvencionalnom laboratorijskom mikroskopu bez uranjanja.

Kondenzator mikroskopa mora biti izostavljen, dijafragma je sužena. Na početku se lijek nalazi na staklu s malim povećanjem (40x), naknadna studija se proizvodi s većim povećanjem (100x);

detaljno se lijek proučava povećanjem 400x. Potrebno je istražiti nekoliko lijekova kako bi se povećala pouzdanost analize i izbjegli lažne pozitivne rezultate.

Pogreške u mikroskopskoj dijagnozi gljiva mogu se pojaviti u vezi s obje nedostatke za pripremu lijeka i nedovoljnog eksperimenta laboratorija.

Proizvodni nedostaci su prije svega povezani:
uz pregrijavanje lijeka, koji može dovesti do gubitka kristala alkalije, uništavanje kose i pojave finog zrnatog propadanja u patološkom materijalu.

Linearna lokacija izduženih glatkih kristala alkalije vrlo je slična nitima septičke micelerije čak i na čistom staklu bez patološkog materijala.

Diferencijalni dijagnostički znakovi su izuzetna monotonija kristala, njihove staklastičke transparentnosti, višestrukih ivica i nedostatak nerazdvojne veze jednog elementa s drugim. U sumnjivim slučajevima, preporučuje se dodavanje kapljice u lijek blago grijanu destiliranu vodu, koja brzo rastvaraju kristale alkalije.

Za elemente gljivice može se pogriješiti:


- kapljice masti,
- Bubblevi za zrak,
- Kombine za pamučne odjeće
- i takozvane "mozaičke gljivice".

Lipidi kože, debeli propadanje ćelija i zrna keratogialine, posebno onih ispravnog oblika, mogu ličiti na odvojene sporove gljiva. Ali raznolikost oblika i, što je najvažnije, veličina, nepostojanje unutrašnje strukture formacija (vakuola, školjka) govori se protiv gljivične prirode ovih elemenata. Lipidi mogu pasti i u lijek prilikom uzimanja patološkog materijala sa nedovoljno pročišćenim fokusom lezije.

Mjehuri za zrak mogu podsećati na sporove nalik kvascima, ali za razliku od potonjeg, okruženi su gustom tamnom omotačem, pa čak i najmanji zračni mjehurići uvijek više od ćelija gljiva.

Teme iz tkanine čarapa, odjeće itd. Obično leže odvojeno od patološkog materijala, oni su uvijek više hichams, rougher i ne septulirani.

"Mozaik gljivica" je artefakt koji se javlja u procesu kristalizacije (možda zbog propadanja holesterola). Ima oblik mreže ili petlje, čiji su obrisi odgovaraju granicama pohotnih vaga, za razliku od niti micelijuma, nikad ne prelazi zidove ćelija epiderme.

U nekim laboratorijama, prosvetljenje lekova za mikroskopski pregled vrši 15-30% rešenja sa rešenjem u kojem 5 - 10% komercijalnih tamnih plavih mastila Parker (Parker "Superchrome plavo-crna mastila).

Uz ovu boju, gifovi i sporovi obojeni su u plavoj boji.

U mikroskopiji se nalaze nilamenti gljive ili obvezujućih ćelija (Sl. 1).

Stoga mikroskopija donosi zaključak samo o gljivičnoj prirodi infekcije, ali ne o obliku gljiva-patogena.

Naravno, efikasnost mikroskopskog istraživanja ovisi o kvalifikaciji zaposlenika laboratorija.

Sl. 1. Razmak od mikroskopije sa noktima pogođenim T. Rubrumom. Gif su vidljivi.



Kulturna istraživanja

Provedite materijalnu sjetvu u standardnoj srijedu Saburo, često sa aditivima protiv antibiotika. U dijagnostici dermatofite infekcijama, to je uobičajeno dodavanje cikloheksidida u Saburo medij, što je neodoljivo povećanje airBones-kontaminanata koji padaju iz zraka. Postoje gotovi komercijalni okruženja s aditivima antibiotika i cikloheksimid. Treba imati na umu da mnoge gljive kalupa i neke vrste Candida ne rastu na mediju s cikloheksimidom, pa se preporučuje da se sjetve u Saburo srijeda s cikloheksimidom i u srijedu bez njega. Identifikacija vrsta se obično vrši mikroskopskom studijom rastuće kulture ili postavljanjem selektivnog medija (Sl. 2-15).

Sl. 2. Kultura gljiva T. Rubruma, izolirana od pogođenih noktiju. Primljeno na saburo okruženju (lijevo) i kukuruzni agar (desno).

Sl. 3. Kultura gljiva T. Mentagrofits Var. Međudigitalno istaknuto od pogođenih noktiju. Primljeno na saburo okruženju.

Sl. 4. Candida Albicans Kultura gljiva. Primljeno na saburo okruženju.

Sl. 5. Kultura torulopsisa Glabrata gljiva izolirana od pogođenih noktiju. Primljeno na saburo okruženju.

Sl. 6. Kultura gljiva je ulocladium sp. Istaknuta od pogođenih noktiju.

Sl. 7. Mikrofolološka acremonium Sp. Odabrano od pogođenih noktiju.

Sl. 8. Mikromorfologija Fusarium Sp. Posećeni iz pogođenih noktiju.

Sl. 9. Mikromorfologija Scopulariopsis Sp. Odabrano od pogođenih noktiju.

Sl. 10. Candida Albicans Micromorphologija izolirana od pogođenih noktiju.

Sl. 11. Mikromorfologija Altemaria Sp. Izolirani od pogođenih noktiju.

Sl. 12. Mikroprologiju Aspergillus sp. Izolirani od pogođenih noktiju.

Sl. 13. Mikromorfologija Ulocladium SP-a, izolirana od pogođenih noktiju.

Sl. 14. Mikromorfologija Chaetomium Sp. Izolirani od pogođenih noktiju.

Sl. 15. Prehrambena ploča za identifikaciju dermatofita (lijevo - Kultura T Rubum, desno - T mentagrofiti var. Mterdigitale).

S lijeva na desno: srijeda Saburo, Mackener srijeda, kukuruz, kukuruz AAR

Treba napomenuti da su neke gljive kalupa, uključujući dermatofite, polako rastu u kulturi, za 2-3 tjedna.

Čak i sa svim pravilima za prikupljanje materijala, uz dobru opremu laboratorija i visoke kvalifikacije svog osoblja, broj pozitivnih rezultata istraživanja kulture je vrlo mali.

Prema vanjskoj literaturi, postotak pozitivnih istraživanja ne prelazi 50.
Postotak pozitivnih rezultata u najboljim domaćim laboratorijama jedva doseže 30.

Dakle, u dva od svakih 3 slučaja onikhomikoze, nije moguće uspostaviti svoju etiologiju.

Lumininecentna studija

1925., Margaret i Deveze otkrili su da kosa pogodi neki dermatofiti daju karakterističan sjaj u ultraljubičastim zracima propuštenim putem filtera. Glass Byda sastoji se od barijum sulfata, sadrži oko 9% nikl oksida; Preskače zrake dužinom od 365 Nm. Različiti uređaji mogu se koristiti kao izvor ultraljubičastih zraka. Priroda sjaja definitivno nije instalirana. Kosa i dalje svijetli nakon smrti gljiva i nakon pokušaja izvlačenja fluorescentnog materijala vrućom vodom ili hladnom otopinom natrijum bromidom. Intenzitet i priroda sjaja ovise o pH rješenja. Vjeruje se da se fluorescentna supstanca pojavljuje u procesu interakcije između gljiva i rastuće kose.

Sjaj u ultraljubičastim zracima koji se prelazi kroz filter za drvo odlikuje se samo za kosu zahvaćenu gljivama roda Microsporum (M. Canis, M. AudOuinii, M. Ferrugineum, M. distuijum, povremeno M. Gips i M. Nanum), kao i Trichophyton Schonleinii. Kosa koja pruža mikrosporum, posebno M. Canis i M. Audiouinii, daju najživiji sjaj; Kosa, pogođena T. Schonleinii, imaju prigušenu zelenkastu fluorescenciju.

Sjaj se posmatra samo u kosi u potpunosti pogođenim gljivama. Možda neće biti u svježih lezija žarišta. U tim je slučajevima potrebno ukloniti kosu iz regionalne, najaktivnije zone, a sjaj se može otkriti u korijenskom dijelu kose.

Luminescentna metoda može se koristiti i za dijagnostiku i kontrolu efikasnosti liječenja u pojedinim pacijentima i u epidemiološkoj žarištu. Kompaktne mobilne instalacije pogodne su za anketu o kontakt osobama u školama, vrtićima itd.

Luminescentni pregled mora se proizvesti u zamračenoj sobi, LESION žarišta mora biti unaprijed očišćen iz kore, ostataka masti itd. Fluorescentna metoda može se koristiti za dijagnosticiranje lišavanjem hebona, posebno kada lokalizirate lezije na vlasištu. LESION žarišta u ovoj bolesti ima crvenkasto žuto ili smeđi sjaj. Ovaj sjaj, međutim, nije strogo specifičan, jer se može primijetiti u prisustvu peruti na vlasištu, pa čak i kod zdravih ljudi u području usta folikula kose na licu i gornjem dijelu tijela . Pogođena kosa identificirana uz pomoć luminescentne metode mora biti podvrgnuta mikroskopskom pregledu.

Imunološka i biološka istraživanja

Imunološke metode istraživanja koriste se za identifikaciju specifičnog restrukturiranja organizma i serološke dijagnostike gljivičnih bolesti. Za otkrivanje određenih serumskih antitijela vrše se sljedeće serološke reakcije: aglutinacija, oborine, obvezujuća kompletna, imunofluorescencija s odgovarajućim antigenima.

Alergijski uvjet pacijentovog tijela otkriva se koristeći alergijske uzorke kože. Alergeni se nanose na probosnu kožu na pokupu ili trljaju u kožu na moro, intradermalno na mati, kao i ubrizgavanje u kožu. Uz pomoć ovih uzoraka otkrivene su alergijske reakcije neposredne i usporene vrste, što omogućava procjenu stanja humoralnog i staničnog imuniteta.

Da bi se identificiralo specifična osjetljivost limfocita, degranulacijske reakcije basofila, aglomeracije i izmjene, test transformacije eksplozije, suzbijanje migracija makrofaga itd.

Poređenje seroloških rezultata i alergijske reakcije Ispada da je korisno i za dijagnozu i za prognozu protoka mikoza.

Biološka metoda. Koristi se za laboratorijsku dijagnozu dubokih i posebno opasnih mikoza. Na osnovu zaraze životinja patološkim materijalom od pacijenta ili kulture gljivice u studiju. Izveden u posebnim laboratorijama.

Histološki pregled

Histologija mikaze kože zbog dermatofita

Patomorfološke promjene u Lezijama žarišta nastaju zbog uvođenja gljiva u sloju roga epiderme, kose i noktiju i reakcije na upalu kože, koja može biti akutna, subakutna ili hronična. Dijagnoza se može razmotriti samo ako se u histološkim pripremama otkrivaju elementi gljiva. U tu svrhu se koristi različita histološka boja, najistaknutija je reakcija periodične kiseline (PAS), što omogućava identifikaciju polisaharida koji su dostupni u celulozu i kitinu ćelijskog zida većine dermatofita (boja u Chif-u i njegovu modifikaciju). Takođe možete koristiti reakcije sulfatizacije i impregnaciju histoloških presjeka sa srebrom [Khmelnitsky O. K., 1973; Lewer W. F. i Schaumburg-Lewerl., 1983].

Gljive u sloju roga epiderma, čak i kada se koriste posebne boje, otkrivaju se u malom iznosu kao niti micelijuma i spora. U rijetkim slučajevima, kada u lezijama ima mnogo gljiva, mogu se otkriti u odjeljcima obojenim hemotoksilinom-eoninom, u obliku nježnih bazofilnih struktura u sloju roga.

Upalne promjene u epidermiju mogu biti različite: od beznačajnih intra-i ekstracelularne otoka za izrečenu spongiozu. Sprongioza se obično razvija za vrijeme sudskih varijanta primjeraka zaustavljanja i četkica, klinički, u ovim slučajevima se bilježe mjehurići. Razlog ove reakcije obično je T. mentagrofiti var. Interdigitalno. Ponekad postoji izražena hiperkeratoza u epidermi, koja se najčešće primijeće u mikozi zbog T. Rubruma.

Histološke promjene u dermisu su nespecifične i odgovaraju akutnom, subakutnom i hroničnom upalu.

Sa glatkom kožom sa glatkom kožom uzrokovanom T. Rubrumom, gljive se ponekad otkrivaju u lampanjskom kosu i folikulu kose. Upalni odgovor se razvija oko folikula, koji ulazeći u branu, gljive mogu steći granulomatozni karakter. Središnji dio infiltracije u tim slučajevima može biti podvrgnut suppuraciji i nekrozi, a periferni se sastoji od limfocita, histocita, epitelioida i višejezgrenih divovskih ćelija, unutar kojih se sporovi gljiva ponekad otkrivaju. Veličine spora ovdje dosežu promjer od 6 μm, u kosi obično ne prelaze 2 mikrona.

Sa infiltrativnim oblikom mikoze vlasišta i polje rasta brade i brkova, elementi gljiva nalaze se u folikulu kose, unutar i oko kose. U kosi su definirani tik iznad zone početka keratinizacije (približno na nivou 30 mikrona). Dermis ima napomenu na upalni odziv različitih intenziteta, najprimišljeniji na Kerion Celsiiu. U akutnom gnojnu reakciju u sastavu infiltrata primećuje se veliki broj neutrofilnih leukocita, elementi gljiva u ovom slučaju mogu u potpunosti nestati. U hroničnom protoku procesa, infiltrat može steći granulomatozni karakter, u njemu se pojavljuju višejezgrene džinovske ćelije. Da bi se potvrdila dijagnoza u nedostatku gljiva u infiltratu, mogu se koristiti imunofluorescentne metode boja. U ove svrhe, fluorescin koji označava virus koristi se za T. mentagrofite, što vam omogućava da otkrijete antigene gljive u kosi i u peripolikularnom infiltriju.

Formiranje infiltrativne vrijednosti kože u mikozi vlasišta (Kerion CelSII) i područje rasta brade i brkova, zbog gljiva M. Sanis, T. Tonsurans i T. Verrucosum, manifestacija je imunološki odgovor. O tome dokazuje:

1. nagib žarišta lezije do spontane rezolucije.

2. Nedostatak gljiva elemenata s vrlo izraženom upalnom reakcijom sa kože s mikozom uzrokovanim T. Verrukosumom (Faviforme) i T. Tonsurans.

3. Trajno pozitivna reakcija Kao odgovor na intradermalnu upravu Tricoooofa sa infiltrativnim vrijednim oblicima Mikoše, uzrokovane Zoo trikofidima (na primjer, T. Tonsurans) i negativno - sa površinskim metodama uzrokovanim istim T. Tonsurancima.

Uz favus u sloju roga u epidermu, nalazi se veliki broj mina micelijuma i pojedinačnih spora gljiva. Scoundula je predstavljena eksudatom, najkraćim stanicama epiderme, ćelija upalne infiltrate, kao i niti grinja i spore gljiva, koji se nalaze uglavnom u perifernom zonu. U aktivnoj fazi bolesti u dermisu oko protoka degenerativne kose nalazi se izražena upalna infiltracija koja sadrži višejezgrene divovske i plazma ćelije. U staru žarištu lezija nedostaju kosa i lojne žlijezde, postoje pojave fibroze.

Histologija mikaza kože i sluznice uzrokovane gljivama poput kvasca

U kandidama kože i sluznice, gljive roda Candida nalaze se u sloju roga epiderma ili u površinskim slojevima epitela sluznice. Elementi gljivice obično su mali, dobro su obojeni pastom ili u gramu; Predstavljen u obliku nijanmentora micelej septičke grane, veličine 2-4 μm promjera ili ovalnih sporova, promjera 3 - 5 μm. Dijagnostička vrijednost je otkrivanje Murcia kalupa.

Histološkim pregledom hronične granulomatozne kandidijaze kože i sluznice, elementi gljivice se također poželjno nalaze i u sloju roga epiderme ili najviše gornji odjel Epitelijum sluznice, ali ponekad u pilingu, unutar kose i u dermisu. Tu je i izražena hiperkeratoza i papilomatoza; U dermisu - gusta upalna infiltracija koja se sastoji od limfoidnih ćelija, neutrofila, plazme i višejezgrenih divovskih ćelija. Infiltrate se može proširiti na potkožno masno tkivo.

Sa zdjelom epiderme, veliki broj gljiva elemenata u obliku nježnih bazofilnih konstrukcija, koji su jasno vidljivi čak i uz boju hemotoksilin-eozina, nalaze se u horni. Gljive su predstavljene oba niti i sporovima.

U folikularskom obliku Hebsena, poluga se primećuje nakupljanje pohotnih masa i ćelija upalne infiltrate u proširenim ustima folikula na kosu. Upalno infiltracija se takođe primećuje oko folikula. Sa PAS reakcijom, sfernim ili ovalnim sporovima gljivice, promjera 2-4 μm, pronađene unutar usta folikula kose, a ponekad u peripolkularnom infiltriju. Mycelium nikad se ne otkriva.

Kršenje pigmentacije kože kod pacijenata sa grijanim uskraćenim zbog sposobnosti gljiva pityrosporum sa suppresima koji tlače proces formiranja pigmenta u epidermisu. Elektronsko mikroskopsko istraživanje kožnih biopsija s hipocignitim lokacijama pokazalo se da se u melanocitima formiraju vrlo mali melanociti koji nisu u stanju probiti u keratinocite. U hiperpigmentiranim područjima kože, naprotiv, melanosomi su veliki i sadrže veliki broj melanina.

Glavna u etiološkoj laboratorijskoj dijagnozi mikoza do danas, klasične metode i dalje se nastave, uključujući materijalnu mikroskopiju, odabir neto kulture patogena praćena njenom identifikacijom. Imunološke dijagnostičke metode imaju pomoćnu vrijednost. Koriste se za identifikaciju najznačajnijih patogena: patogene dimorfne gljive, kao i kauzativne agente kriptokokoze, kandidijaza i aspergilleze. Metode predstavništva gena (lančana reakcija polimeraze) također imaju ograničenu upotrebu zbog nedovoljne specifičnosti, ali se koriste uglavnom u dijagnozi dubokih i oportunističkih mikoza.

Materijal za studiju sa laboratorijskom dijagnozom mikoza, ovisno o obliku bolesti, može biti: koža i njegovi dodaci (kosa, nokti), odvojeni ranama i fistulom, ispljunim, krvi, pićem i urinom, biopsijom tkiva. Ispravnost uzimanja patološkog materijala u velikoj je mjeri određena efikasnošću daljnje laboratorijske istraživanja. Pod kožnim lezijama materijal se najčešće odabran metodom struganja ili upotrebom ljepljive trake (uglavnom na površinskim oblicima) prije tretmana svježeg, ali potpuno razvijenog žarišta na periferiji, gdje se nalaze najodreživiji patogeni.

Kada se otkrije gljive dermatofita, kosa je izuzetno informativna, jer vam priroda oštećenja kose omogućava identifikaciju patogena. Definicija fokus lezije u nekim slučajevima pomaže u korištenju lampe za drvo. Pogođena kosa zajedno sa vagama izvlače se sa epilatornim pincetom. U hroničnom crnom trico tricoeticsu, kosa se uklanja sa kože sa unaprijed plaćenom iglom.

Nokti su odabrani u cijelim slojevima, odsječeći oštru skalpela ili škare. Efikasniji izbor pomoću četkice za zube. Sa kandiditnim lezijama materijal je odabran pomoću opsega iz valjka za nokte. Odabrani materijal isporučuje se u laboratoriju u tamnim papirnatim vrećicama kako bi se izbjeglo sušenje i kontaminaciju s vanjskom mikroflorom. Materijal koji sadrži gnoj se isporučuje u sterilnom baptiku ili petrim jelima. Sputum je odabran u sterilnom jelima. Vlažno istraživanje treba izvesti najkasnije 2 sata nakon prikupljanja. Prilikom produženja proširenja studije, uzorci trebaju se pohraniti u hladnjaku na + 4 ° C, mogu se pojaviti dijagnostičke pogreške povezane s izgledom pseudomOmiliziranih oblika kvasca.

Krv i kičmena tekućina biraju se u skladu sa aseptičkim pravilima. Krv sjetve vrši se u tečnom mediju sabula. Za uklanjanje kontaminacije uzoraka krvi provode se njihovo ponavljano istraživanje. Spinalna tečnost Centrifugirani, a talog se koristi za mikroskopsku i sjetvu.

Urin je odabran ujutro u sterilnim jelima, dok je potrebno izbjeći zagađenje materijala mikrofloriske kože međunožjevima. Morina za sjetvu vrši se korištenjem kvantitativnih metoda sije.

U dijagnostici mikoza, pripreme se koriste i iz matičnog materijala i oslikane. U studiji neupadnih lijekova, gusti materijal je unaprijed prosvijetljen (mackery) 10-30% con (rješenja sumpornog dimetila), a zatim mikroskopska metoda "drobljenog pada". Da bi se primerili kontrast, pripreme se okriju vodenim otopinom metilenskog plave boje.

Boja fiksnih razmaza vrši se na različite načine: u pogledu grama, metilen plave boje, prema Romanovskom - teretanu. Posljednja metoda omogućava vam da vidite stanice s malim kvascima i korake fagocitoze. Za Cryptococke koristite bojansku mastilu, slikanje sa blatskaminom u soutgeitu. , Na primjer, gljive koji sadrže melanin (tamne boje) Cladophialofora Bandana., obojena masom - fontana (slika melanina, koja je dio ćelijskog zida). Fluorescentni serumi koriste se u dijagnostici dubljih mikroza patogena, dermatophyatophyte patogena, originalne Candida.

Odabir čiste kulture patogena omogućava uspostavljanje generičke i vrste pripadnosti gljivica, proučavati njegova svojstva i osjetljivost na antimikrobne lijekove. Za raspodjelu i identifikaciju gljiva korišteni su gusti i tečni hranjivi mediji, Suslo-agar. Ovi mediji osiguravaju rast većine patogenih i uvjetovanih patogenih gljivica. Pored toga, saburo okruženje (Sl. 8.2) stimulira procese formiranja pigmenta u gljivama, koji su važni prilikom identifikacije.

Antibiotici se dodaju da se suzbija rast bakterija - kontaminanti u medijumu: lijevomicetin, streptomicin, penicilin, tetraciklin. Da biste izolirali ćudljive patogene gljivice, koriste se medijima obogaćene krvlju i kardiovaskularni ekstrakt. Posebni mediji koriste se za uzgoj i identifikaciju gljiva: za formiranje konindijuma prilikom identifikacije gljivica kalupa, krompira (krompir-mrkva) Agar, Rice Agar - za identifikaciju klamizovanog rasta prilikom identifikacije gljiva roda Candida., šargarepa (povrće) agar - za dobivanje tipičnih kolonija kulture gljiva Trichophyton Schonleini, Cashkin srijeda - da istakne gljive koji formiraju pigmente. Korišteni su diferencijalni dijagnostički mediji za identifikaciju C. albicans - Hromogeni mediji ili medij za određivanje fosfolipaze aktivnosti gljivice.

Vrijeme inkubacije gljiva je od nekoliko dana do 1 mjeseca ili više. Sa sumnjivim patogenim dimorfnim gljivama za izdavanje negativnog odgovora, uzgoj se provodi 8 tjedana.

Izvođenje se izvode na medijima, prolivene na ispitnim cijevima, bocama i petrijevim jelima. Materijalni usjevi na dermatofiphyphiyphiphiphite gljive provode se istovremeno nekoliko cijevi sa medijom. Materijali Sumnjivi na sadržaju gljiva kalupa (mokri) zasijane su u 3 boda i inkubiraju se na 28 i 37 ° C. Da bi se riješilo pitanje odsustva kontaminacije u ogradi materijala, upravljačkim sustavima zraka na održavanju kalupa gljivica u prostorijama laboratorijskih i komora u kojima se nalaze pacijenti.

Kada uzgajate gljive u mikrološku laboratoriju, sigurnosne mjere se primjećuju slično onima u bakteriološkim laboratorijama. Rad sa kalupnim gljivama i mikotoksinima kako bi se izbjegli alergovi, osoblje koje se ponaša u boreksiranim sobama u zavojima gaze ili u kutijama sa stolom sa ekstraktorom. Rad sa kulturama koje pripadaju II grupi patogenosti (patogene dimorfne gljive) moguće je samo u specijaliziranim laboratorijama.

Identifikacija vrsta gljiva vrši se na osnovu kompleksa kulture, morfoloških i drugih znakova. Prvo uključuje morfologiju kolonije, njegova slika i veličina uzgoja u posebnim okruženjima, strukturi regije i centra, priroda površine, prisutnost i priroda reproduktivnih organa, do druge karakteristike Mikroskopska struktura micelijuma, strukturu, oblik i veličina reproduktivnih organa - sjedala za koliziju, koniziju, klamizlospore, artrospore, itd.

Gljive formiraju različite vrste kolonija na gustim hranjivim medijima. Naučnici iz Instituta za Venther (SAD), s obzirom na sposobnost gljiva da dodijeli pigmentne tvari u srijedu, stvorile su "novogodišnje božićno drvce" u hranjivom mediju (Sl. 8.3).

Sl. 8.3. "Novogodišnje stablo" iz gljiva (vrh: Talaromyces stipitatus.; drvo Aspergillus Nidulans;ukrasi: Penicillium Marneffei; Pautak: Aspergillus terreus)

Enzimski i asimilativno kulture imaju velika važnost Prilikom identificiranja kvasca (gljivice poput kvasca). Trenutno se primjenjuju komercijalni testni sustavi za identifikaciju čestih gljivica - kauzativnih agenata: BBL Mycotube, API 20C Bio Merieux itd.