Úloha laboratórnej diagnostiky pre plesňové ochorenia. Laboratórna diagnostika mykóz * moja dermatológia

4402 0

Bohužiaľ, a v súčasnosti je možné uviesť, že diagnóza plesňových ochorení je často neprimeraná (zóny poruchy tela, peeling je často prijatý pre "lupiny", "suchosť"). Zároveň subjektívne pocity (svrbenie, bolesť atď.) V ohniskách porážky často nie sú tam a pacienti sú spôsobené týmto dlhý čas Nie súťažiť na špecialistu.

Zmeny na nechty (škaredé, rozpadové, riedené) sú považované za "onodiodstrofiu" po zranení, omrzliny atď., Zároveň (dokonca aj izolované lézie, mimochodom) môžu viesť k tvorbe alergickej reštrukturalizácie tela, ovplyvniť Krvné a lymfatické cievy a iné. Pacienti súčasne zostávajú zdrojom propagácie plesňovej infekcie. V súvislosti s vyššie uvedeným je včasná laboratórna diagnostika mykóz včasná laboratórna diagnostika mykóz, správanie včasnej liečby.

Rozmanitosť klinických variantov plesňových ochorení, výhodne našla u ľudí, ako aj vlastnosti mikrobiológie, morfosštruktúr, imunologických a iných parametrov rôznych typov (a rodov) húb viedli k prítomnosti významného množstva diagnostických metód mykóz; Treba poznamenať, že existujúce metódy sa neustále zlepšujú a (relatívne nedávno) majú druhu zaujatosti smerom k imunologickým a molekulárnym genetickým testom.

Na druhej strane kultúrny výskum a doteraz "sú v kategórii noriem v blízkosti zlata" a používajú sa na potvrdenie pochybných výsledkov iných štúdií; Predpokladá sa, že kombinácia kultúrnych a molekulárnych genetických metód s "pochybným" v diagnostickom pláne foriem mykóz (najmä šírení, proti pozadia imunosupresie akejkoľvek genesis, s porážkou vnútorných orgánov atď.) Jedným z najspoľahlivejších spôsobov, ako zaregistrovať mychotickú povahu procesu.

Avšak, zanedbávané "staré" techniky, najmä bakterioskopia (najmä predbežného prieskumu), najmä preto, že v každodennej praxi, mikroskopické "overovanie" Mikosa v mnohých dermatologických inštitúciách je v porovnaní s inými testmi.

Berúc do úvahy výrazný nárast počtu alergických prejavov na koži (a niekedy viscerálnom) - s dlhou, chronickou, periodicky zhoršujúcou tok Mikosa (kože, nechty atď.), Je vhodné vyhlásiť alergologické testy, umožnenie identifikácie stupňa senzibilizácie tela, vrátane kombinovanej infekcie bakteriálnej hubov; Táto skutočnosť môže ovplyvniť špecifiká liečby v konkrétnom pacientovi - napríklad určiť racionálny účel antimicotiká a desenzibilizačných činidiel atď.

Tradične je predpokladaná diagnóza plesňového ochorenia na základe klinických prejavov a je potvrdená laboratórnym výskumom.

V tejto časti knihy stručne predstavujeme základné metódy registrácie mykóz (bez ohľadu na ich lokalizáciu), vzhľadom na "typ výskumu a prijatých materiálov". Treba poznamenať, že polymorfizmus klinických prejavov mykóz (vrátane alergickej zložky) spôsobuje, že sa bude študovať rôzne patologické materiály. Zároveň úspech vyhľadávania prvkov huby závisí od správneho vezmi.

Periférne zóna erytemo-skvamózne, často zistená vyrážka je bohaté na mycéliu, huby spory; Na chlpatých oblastiach lézie, jazdného, \u200b\u200bbelavé, sfarbené, matné vlasy alebo ich fragmenty sa odoberajú - "konope" (herec oplotenie je vhodné ovládať drevené žiarenie). Určité zručnosti si vyžadujú plot materiálu (pomocou ihly) z tzv. "Čierne bodky" - tmavo nadržané kužele v ústach folikulov.

V každodennej praxi sa zvyčajne skúmajú váhy kože (zmontované zoškrabaním, rozmazaním, s použitím lepkavej pásky), oškrabanie modifikovaných nechtov, zóna hyperkeratózy subntogénu, ako aj oddelených sliznicových membrán. Podľa svedectva, spúta, tekutiny, moču (u pacientov s noncateterizovaným močový mechúr); Zavlažovanie z močových, obkladových plavidiel nemožno prijať na výskum.

Krv (pre kultúru výskum, ako aj IFA, PCR), likér a iné bioises organizmu (pleurálne, intra-artikulárne, intraperitoneálne - vr. Zozbierané aspiráciou alebo drenážou); V niektorých prípadoch (v závislosti od lokálnej diagnózy), žlč, výkaly sú dôležité, subkutánne abscesové body oddelené fistúrkami (najmä s hlbokým mikrosakom). Dokonca aj nekomplikované diagnostické testy vyžadujú presné dodržiavanie viacerých podmienok.

Metódy v súčasnosti žiadajú o diagnózu plesňových ochorení:
- mikroskopia; Na základe detekcie patogénu v štúdii podľa materiálu, vr. v mužských tkanivách;
- kultúra štúdia s následnou mikroskopickou štúdiou kultúry huby;
- histologické vyšetrenie (g.o. s hlbokou mikroskovou);
- imunitné a molekulárne metódy.

Mikroskopická diagnostika

Mikroskopická diagnostika zahŕňa štúdiu neinfarovaných (natívnych) a maľovaných liekov. Táto metóda, ako je uvedené, je najbežnejšia v dermatologickej praxi v dôsledku porovnávacej zdravotného postihnutia a nízke náklady, ale na druhej strane nie je dostatočne citlivá, vyžaduje čiastočne prípady opakovaných testov, čo potvrdzuje iné techniky.

Takže v štúdii neinknutých liekov, okrem prvkov huby, je možné detegovať epithelocyty, krvné bunky, rôzne kontaminácie vonkajšie prostredieČo sťažuje hľadanie kauzačného činidla Mikosy, vyžaduje ďalšiu "prípravu" materiálu - tzv. "Osvietenie" jeho (macerácie), koncentrácie, riedenie atď.

Priama mikroskopia natívnych liekov umožňuje rýchlo diagnostikovať mykózu, určiť, aké výživové médium (ak je to potrebné), je potrebné zaistiť, existuje názor, že jeho pozitívny výsledok môže zostať jediným laboratórnym potvrdením Mikosa s negatívnou odpoveďou v kultúre ( A.YU. SERREGEEV, YU.V. SERRESEV, 2003).

Medzi rôznymi variantmi "osvietenia" liekov, najbežnejším je pridať do materiálu pod štúdiom alebo NaON (často sa používa na detekciu húb v kožených vločkách, vlasoch, ako aj radom hlbších sľudových patogénov v spumu , BiopsyATs).

Pre maceráciu rozdrveného a umiestnenia na predmetové sklo sa váhy vykonávajú 10-20% roztok hydroxidu sodného (alebo draslíka) - 1-3 kvapiek, počas 10-20 minút; Liečivo je mierne lisované náterovým sklom, pre rýchlejšie macerácie - ohrievané na plameňoch, kým sa výpary objavia. Prezeranie najprv pod malým zväčšením, potom pod veľký (suchý systém).

Správne pripravený liek, ktorý nie je podrobený hrubým mechanickým, tepelným a chemickým účinkom, je obrazom homogénnej hmotnosti pozostávajúcej z epithelocytov, produktov bunkového rozpadu prvkov húb mycélia a sporu.

Modifikované vlasy sa umiestnia na snímku s 10-30% alkáliou a sú ošetrené rovnakým spôsobom, ale odolnejší - od 20 minút do 3-4 hodín. S bohatým obsahom pigmentu sa odporúča predfarbiť vlasy 5% roztok peroxidu vodíka. Stlačte hodnotu detekcie prvkov húb, ako aj ich umiestnenie vo vzťahu k vlasom.

Príprava materiálu z patologicky zmenených nechtov (lepší tenký prášok získaný zo škrabania z hĺbky krbu) sa uskutočňuje podobne, ale s použitím 30% hydroxidu sódy, povinné opatrného ohrevu na plameňoch na svetelných výparov a expozície asi 1c (niekedy hore na niekoľko hodín). Prípravky liečené s alkáliou sa nesmú skladovať viac ako 1,5 metra v dôsledku ich "poškodenia" (kryštalizácie činidla, zníženie diagnostickej spoľahlivosti stanoveného mikroskopického vzoru).

Namiesto con alebo poludnie sa môže použiť: a) roztok zmesi COP s 15% DMSO; b) Zmes fenolu (2 dielov) s chloralhydrátom (2 časti) a kyselinou mliečnou (1 časť); c) calckopleorovela biela, s afinitami pre HIGI-No a celulóza; Pre štúdiu je potrebný luminiscenčný mikroskop (je tu modrá alebo zelená žiara, ktorá závisí od filtra Appliant). V štúdii s likérom (s podozrením z kryptocózy) sa často používala maľba s autom.

Kulag V.V., Romanko I.M., Afonin S.L., Kulag S.M.

Základom diagnózy plesňových ochorení je mikroskopická štúdia liekov pripravených z postihnutej kože a nechtov. Mikroskopický obraz v rôznych typoch mykóz je však podobný: spóry húb a rozvetvených septických mycélia s priemerom 4-7mkm sú viditeľné v kožných váhach a nechtoch. Preto, rodu a druh huby vo väčšine prípadov nemožno určiť na mikroskopickom obraze v kožných váhach alebo v zoškrabaní z nechtu. Na identifikáciu patogénu sa plodiny vykonávajú na živných médiách, najčastejšie na stredu Saburo.

Epidermofilácie.Horná vrstva kože je ovplyvnená, najčastejšie zastaví a nechty dolných končatín. Vlasy nie sú nikdy prekvapení. Žlté škvrny alebo pásy sa objavujú na nechtoch, potom hyperkeratóza (zahusťovanie nechtov) sa vyvíja, ich deformácia a zničenie. Na zastávke pokožky je doska peelingové podrážky a interpalové záhyby, začervenanie. Niekedy sa vytvárajú bubliny, priemery, trhliny. Choroba je sprevádzaná svrbením, pálením, bolestivosťou.

S mikroskopickým vyšetrením kúskov, recond, bubny pneumatiky sú určené malým axigizovaným závitom mycélia s priemerom 3-5 mm, časť závitov spadajú do okrúhlych a obdĺžnikových sporov.

Trikhofysia.Toto je hubové kožné ochorenie a jeho prívesky s osobitnou tendenciou zasiahnuť jej vlasy [lat. trichos. Vlasy +. phyton. huby]. Na pokožke hlavy sa objaví početné lézie ohniská s priemerom približne 1,5 cm. Koža na nich je edém, hyperemický, pokrytý šupinami. Vlasy v ohnisku sú nitované na úrovni 2-3 mm nad povrchom pokožky, odkiaľ a názov "struning zbavený".

Mikroskopické vyšetrenie odhaľuje charakteristický znak húb Trejofiton typu - usporiadanie ich sporu s reťazami. V závislosti od vlastností húb rozlišuje:

Endothrix (patogén povrchovej Trico). Huby rastú vo vlasoch dramaticky meniť jeho štruktúru. Všetky vlasy sú naplnené (nafúknuté) s paralelnými radmi reťazcov pozostávajúcich z veľkého zaobleného alebo štvorcového sporu;

Ectothrix (patogender hlbokého triku), v ktorom sú vlasy zahalené v prípade malých alebo veľkých argumentov umiestnených pozdĺž osových reťazcov.

Favus - parsh.Vlasy a koža sú postihnuté, menej často - nechty. Vlasy sa stávajú jemným, nudným, "plávaním", ako starobylé parochne, ale nie flutrued. Pre kožnú léziu, vzhľad žltej sivej kôry (klapky) s vyvýšeným, ako je to, že saunts, hrany.

S mikroskopickým vyšetrením sa detegujú vzduchové bubliny vo vnútri postihnutých vlasov.

Microspora.Ovplyvnená koža a vlasy. V léziách lézie sú vlasy okolo 6-8 mm nad povrchom kože. Belavé kryty sú viditeľné okolo zostávajúcej konope.

S mikroskopickým vyšetrením postihnutých vlasov sú viditeľné spory, ktoré sa nachádzajú okolo a vnútri vlasovej mozaiky (náhodne). Sú veľmi malé (1-3 mm), teda názov ochorenia. Diagnóza MicroSPORUS pomáha charakteristickému luminiscenčnému vlasu luminescence.

Keď sa zistia mikroskopické vyšetrenie, zaoblené väzbové bunky, často vo forme hroznaného klastra.

Hlboké (formy) Mycoses.Častejšie sa nachádzajú ako profesionálne choroby v podnikoch na výrobu antibiotík, v poľnohospodárskych pracovníkoch v kontakte s plesnivým obilím, senom, kompostom atď. Prívotnom činidle penicilliózy (hubová huba) má hrubý, široký, septický mycelium končí štetcom. Kauzálny agent Mulkos má široký nedokončený mycéliový koniec s vreckom s spormi. Prívotnom činidle Aspergilleza (tvarovaná forma) sa často nachádza na plesnivých plodoch, chleba. Má hrubé septické mycélium končiace s expanziou, z ktorej sa môžu pripomenúť závity sporov, ktoré sa pripomínajú vodu.

Aktinomykóza. Spôsobené rôznymi typmi žiarivého huby. Vyznačuje sa tvorbou na koži, slizniciach a vo vnútorných orgánoch hustých infiltrátov, náchylných na dodaný a vzhľad fistúl. Malé žlté zrná s charakteristickou sálavým okrajom sú viditeľné pre oko v kanalizácii FISTULAS - Actinomycet Dubby. Mikroskopické prípravky sa pripravujú z oddelenej fistuly a spúta.

S malým nárastom Dubber s radiantou hubou majú druhu žltkastých útvarov zaoblenej formy so svetelnou amorfnou strednou a tmavšou farbou okolo okrajov. S veľkým nárastom stredu DUB sa určujú vlákna mycélia a v periférii - Flavóry opuchnutá. Pri maľovaní na gram vlákna Mycelium R + a Kolkovka G-.

Laboratórne diagnostika Pravívne ochorenia sú založené na detekcii huby a definície svojho druhu a typu. Pozostáva z dvoch hlavných fáz: mikroskopické a kultúrne štúdie.

Mikroskopické vyšetrenie

Mikroskopické vyšetrenie je prvým a dôležitým odkazom, ktorý vám umožní potvrdiť predbežnú diagnózu.

Úspech mikroskopickej štúdie závisí do značnej miery na správny plot patologického materiálu. Pre mikroskopickú štúdiu je potrebné si vybrať vlasy, ktoré majú nekonečné príznaky húb lézie (nudné, zlomené, zahustené). Zmenené na vzhľad vlasov odstrániť epilačné pinzety. Pre detekciu jednotlivých ohrozených vlasov mikrosporáciou môžete použiť žiarivkovú lampu s dreveným filtrom (zeleno-modrá žiara).

Pri výbere ohromených vlasov môžete použiť niekoľko ďalších funkcií. Vlasy zasiahnuté mikrosporums, na základni, majú šedý prípad sporu oblečenia. V chronickom tripropide v hrúbke váh, krátka sivá sú zakrivené vo forme "čiarkových" a "spochybňujúcich značiek" postihnutých vlasov, rovnako ako "čierne bodky" (zhrubne čierne, narodené v ústach folikuly ohromených vlasov) . S infiltrative-arogantnou triotériou pre mikroskopickú štúdiu, s výnimkou postihnutých vlasov, môžete použiť hnis a kôry z hľadiska lézie.

Z ohrozenia lézie kože počas microspora, trikochy a mykózy inguinálnych záhybov vločiek je potrebné zoškrabať z periférnej zóny lézie, kde je huba vo viac. Puzovanie vlasov škrabať s kožnými váhami.

V štúdii prekvapených vlasov počas Microspora a Tricochy, pozornosť sa upozorňuje na zvláštnosti usporiadania sporu (vo vnútri alebo mimo vlasov) a ich veľkosť. Tieto údaje umožňujú v niektorých prípadoch objasniť diagnózu, \\ t klinický tvar Mikosa a epidemiológia.

S internou formou interfalázy Stop pre mikroskopický výskum využíva kože vločky a fragmenty vrstvy Macy-Rog. Oddiel nechtov, ktorý je potrebné vziať do mikroskopického vyšetrenia, závisí od formy onychomikózy. S povrchnou formou, musíte sa zoškrabať z povrchu nechtovej dosky.

S najčastejšou distálnou bočnou formou, škrabanie z nechtového postele, z pod tanier (titupne hyperkeratóza) s časťou rezu zmenila nechtový dosku. S proximálnou formulárovou formou pre plot materiálu sa používajú špeciálne metódy (vŕtacie okná s Bormérom, biopsiou nechtov).

S Squamous-Hyperkeratotickou formou Mikosa Stop Stupne škrabanie z Plantarového povrchu. S vypúšťacou formou mboose sú pneumatiky bubliny rezané pre štúdiu.

Zariadenia na prípravu materiálu pre mikroskopický výskum vlasov . Malá kvapka 30% con a predpokladaných vlasov sa umiestni na povrchové sklo skla a zníženej ihly. Kvapka vlasov sa mierne zahreje nad plameňom alkoholu, kým sa výpary nezmení nad povrchom kvapaliny alebo straty okraja kryštálov pozdĺž okraja kvapky alkalického kovu. Po zakrytí krytého skla sa prebytočná alkali odstráni filtračným papierom. Liek sa skúma najprv pod malým a potom pod veľký (x 400) zvýšenie mikroskopu.

Šupiny kože a nechtov . Tenké vločky na nechty pre mikroskopické štúdie sa umiestnia na snímku v kvapke 30% con a zahrieva sa pridaním alkálií počas odparovania. Chladený rozbalený liek je pokrytý povlakovým sklom a mikroskopiou.

Hrubá koža a nechty vločky sú umiestnené v centrifugačnej skúmavke a naliate niekoľkými kvapkami 30% con. Trubica sa zahrieva na varenie a odíde 20-30 minút. Kus zmäkčeného materiálu so sklenenou tyčinkou sa prenesie do snímky, stlačí zápas pred vzhľadom "cloud", potom, čo mikroskopia.

Hnis . Pus pokles sa zmieša s kvapkou alkoholu v polovici glycerínu a skúma sa v natívnom prípravku.

Kultúrna diagnóza

Kultúrna diagnostika sa vykonáva na konečné objasnenie diagnózy a objasňujú epidemiológiu. Zahŕňa produkciu huby kultúry s následným mikroskopickým vyšetrením.

Úžasné vlasy, váhy (kože a nechty), bubliny pneumatiky alebo mačička padajú na umelé živné médium. Pri výskyte obrovských kolónií na Petriho miskách môžete urobiť predstavu o spôsobe patogénu (Microsporaum, Trichophyton, Epidermophyton), jeho formy (L. Canis alebo Ferrugineum, T. Violeuceum, Verrucosum alebo Gypseum). Konečné vylepšenie rodu a typu huby je možné len na základe mikroskopickej štúdie získanej kultúry.

Laboratórna diagnostika povrchovej kandidózy

Pre laboratórny výskum na huby podobných kvasinkách sa vyžaduje čerstvý materiál. Pre mikroskopické vyšetrenie, v závislosti od klinických prejavov a lokalizácie lézií, kožené vločky môžu byť odobraté, zvyšky z nechtov, kvapky hnisu z valčeka na nechty, belavých náletov z postihnutých oblastí sliznice úst a vonkajšieho genitálu Orgány, steny vagíny, škrabanie s sliznicami slizníc uretry, ako aj umývačka červenou hranicou pery, ohromených oblastiach kože veľkých a malých záhybov.

V závislosti od miesta porážky a povahy klinických prejavov je materiál pre štúdiu odobraté bavlneným tampónom, skalpelom, slučkou atď. Skin a nechty vločky, zvyšky epidermy a svahov sliznice sú vopred ošetrené s 30% con. Patologický materiál sa skúma v nenatretých alebo maľovaných liekoch.

V prvom prípade sa materiál zmieša s rovnakým množstvom alkoholu s glycerínom. Pri maľovaní z hľadiska gram, kvasinkových buniek a pseudomylínov vyzerajú tmavú fialovú, pozdĺž Cylu-Nielsen - Blue a na Romanovssky-Gymn - Pink-fialová. Zároveň je rozlišovacím znakom kvasinkovej bunky srandu - objav tvaru "presýpacie hodiny". Prijatie materiálu z sliznice ústnej dutiny, genitálií orgánov, z kože červeného hranica pery, z uhlov úst, z kože veľkých a malých záhybov sa uskutočňuje so sterilným tampónom. Tampon po užívaní materiálu je umiestnený v inej sterilnej trubici s kvapalinou potrubím. Skúšobná trubica s tampónom sa posiela do mikrobiologického laboratória. Uvoľnenie čistej kultúry huby rodu Genus Candida sa vykonáva podľa všeobecne akceptovanej mikrobiologickej techniky.

Laboratórna diagnostika mykóz

Prijímanie materiálu pre laboratórny výskum na hubach.

1. SOST 42-21-2-854: Objednávka č. 222/80 z 27.06.00
2. Založenie: pinzety, posuvné okuliare, nožnice, lyžica ľudového.
4. Ukážte: Pravívne choroby.
5. Predmety: Nie.

Príprava procedurálneho úradu:

Zmena riešení.

Variť
-1% RR chlór pre veterinár
-3% RR Chlór - na dezinfekciu obväzov a pinzeta
- Čistenie RR (156 ml. Peroxid vodíka + 5 g. Detergentný prášok + 839 ml. Popísaná voda) - na spracovanie pinzety
- 6% r-r perove vodík - na spracovanie rukavíc.

Algoritmus na vykonávanie manipulácie.

Musíte si vziať pinzety, sklo, lyžičku ľudového, nožnice;
- pacienta pozýva na obliekanie;
- pacient sedí na stoličke alebo gauč;
- M / s.

Vykonávanie techniky:

Zo ohniska lézie na pinzety, aby si vezmite váhy kože a vlasov;
- Zobratý materiál umiestnený na posúvač a zatvorte iným sklom veľkosti.
- Umyte ruky mydlom;
- Pošlite materiál na odoslanie laboratóriu.

Zbierka materiálu

Vezmite nožnice a diapozitívy;
- odrezať kus z voľného okraja nechtu;
- použitý materiál na pokrytie iným sklom veľkosti;

Nožnice a pinzety namočte v 3% roztoku formalínu.

Správny zber materiálu z postihnutých nechtov je kľúčom k úspešnému mikrobiologickému výskumu. Užívanie materiálu, nie vždy zachytávajte oblasti nechtov obsahujúce životaschopné huby. Nezisčné húb v kultúre, samozrejme, nebudú stúpať a nemôžu byť nainštalované.

Pozemok nechtov, ktorý sa musí odobrať, je určený formou onchomicózy.

Takže, s povrchovou formou onchomikózy, by mali byť scurze vyrobené z povrchu nechtovej dosky.

S najbežnejším distálnym podávačom, najobľúbenejšie huby sú umiestnené pod nechtovými platňami. Materiál, ktorý je nasmerovaný do štúdie, by mal obsahovať nielen orezávanie nechtovej dosky, ale aj škrabanie z nechtového postele, z pod tanierom.

Okrem toho by sa mali zachytiť oblasti nezmeneného klinec, pretože najkrajšie huby sú umiestnené na hranici medzi nimi a postihnutými nechtami.

S proximálnou formulárovou formou je materiál ťažký. V týchto prípadoch, niekedy, najmä ak histologické vyšetrenie bude vykonávať alebo odlišná diagnóza, Vezmite biopsiu nechtov, občas používať Bormshina.

S Paronichmi robia váhy z proximálneho valca a od pod ním.

Vo všetkých prípadoch, aby sa zabránilo bakteriálnej kontaminácii, vzorka by mala byť liečená etylalkoholom.

Mikroskopické vyšetrenie

Mikroskopická štúdia patologického materiálu na huby sa vyrába v natívnych a maľovaných liekoch.

Na prípravu neinknutých liekov, výsledné materiály brúsia s skalpelom alebo ihlou vo vákuu a umiestnená na strede posuvného skla. Pre jasnú identifikáciu prvkov huby sa vyrába osvietenie (macerácia) materiálu. Na tento účel sa uchýlil k pomoci rôznych látok, najčastejšie s alkáliou jesť (con, NaOH), ktoré rozpustí epidermálne vločky, hlien, hnis, osvietiť pigment vlasov a tým, aby huby sú k dispozícii na výskum.

Na zmäkčovadlovej kože alebo nechtové vločky, ktoré sú umiestnené na stred posuvného skla, spôsobujú 1-3 kvapky 20 - 30% CON (NaOH) roztok. Materiál podľa štúdie v kvapkách alkálií jemne zahrieva nad plameňom alkoholu až do jemného bieleho ráfika z alkalických kryštálov na obvode kvapky. Nemalo by sa zohriať do varu. Po zahriatí je pokles pokrytá povlakovým sklom, vyhnúť sa vzduchovým bubliny.

R. A. Arabian a G. I. GORSHKOVA (1995) odporúčame osvietené a pokryté povlakovým sklom kožných zvyškov a vlasov, aby sa ponechali po dobu 5 - 10 minút a na nechty - o 30 - 40 minút až po mikroskopikáciu.

Osvietenie liekov sa môže uskutočniť bez zahrievania, na to, že sú ponechané v 20% roztoku con o 30-60 minút alebo použiť iné metódy osvietenia patologického materiálu: chlorallactofenol podľa Amana; laktophenol; Roztok obsahujúci 15% dimetylsulfoxidu a con vo vode. Dobré výsledky sa získajú po osvietení na nechty platní umiestnené v 5% roztoku CON o 24 hodín, vykurovanie v tomto prípade sa nevyžaduje.

Mikroskopický výskum sa vyrába na konvenčnom laboratórnom mikroskope bez ponorenia.

Kondenzátor mikroskopu musí byť vynechaný, membrána sa zúživa. Na začiatku sa liečivo nachádza na skle s malým nárastom (40x), následná štúdia sa vyrába s väčším nárastom (100x);

podrobne sa liečivo študuje so zvýšením 400x. Je potrebné preskúmať niekoľko liekov s cieľom zvýšiť spoľahlivosť analýzy a vyhnúť sa falošne pozitívnym výsledkom.

Chyby v mikroskopickej diagnóze húb sa môžu vyskytnúť v súvislosti s oboma vadami na prípravu liečiva a nedostatočným experimentom laboratórneho spôsobu.

Výrobné chyby sú primárne pripojené:
s prehriatím lieku, ktorý môže viesť k strate alkalických kryštálov, zničeniu vlasov a vzhľadu jemnozrnného rozpadu v patologickom materiáli.

Lineárne umiestnenie podlhovastých hladkých alkalických kryštálov je veľmi podobné vláknam septického mycelium aj na čistom pohári bez patologického materiálu.

Diferenciálne diagnostické príznaky sú výnimočnou monotónnosťou kryštálov, ich sklovito transparentnosť, mnohostranné hrany a nedostatok neoddeliteľného spojenia jedného prvku s iným. V pochybných prípadoch sa odporúča pridať kvapku na liek mierne zahrievanú destilovanú vodu, ktorá rýchlo rozpustila kryštály alkalických kryštálov.

Pre prvky huby sa môže mýliť:

- fatové kvapôčky,
- vzduchové bubliny, \\ t
- bavlnené oblečenie niť
- A tzv. "Mosaic huba".

Lipidy kože, rozpad tuku buniek a zrná keratigiaínu, najmä tých správnych tvarov, sa môžu podobať samostatným sporom húb. Ale najdôležitejšie formy a čo je najdôležitejšie, veľkosť, absencia vnútornej štruktúry formácií (vakuoly, škrupiny) sa hovorí proti hubovému charakteru týchto prvkov. Lipidy môžu tiež spadať do lieku pri užívaní patologického materiálu s nedostatočne purifikovaným zameraním na léziu.

Air Bubbles sa môžu pripomínať bunkové spory podobné kvasinkám, ale na rozdiel od toho, že sú obklopené hustým tmavým plášťom, a dokonca aj najmenšie vzduchové bubliny sú vždy viac ako huby buniek.

Vlákna z tkaniny ponožiek, oblečenia atď. Zvyčajne ležia oddelene od patologického materiálu, sú vždy viac hyphám, hrubšie a nie septované.

"Mosaic huba" je artefakt, ktorý sa vyskytuje v procese kryštalizácie (prípadne v dôsledku rozpadu cholesterolu). Má formu sieťoviny alebo slučky, ktorej obrysy zodpovedajú hranici nadržaných šupín, na rozdiel od vlákien mycélia, nikdy neprekročí steny buniek epidermy.

V niektorých laboratóriách, osvietenie liekov na mikroskopické vyšetrenie vedie 15-30% roztok s roztokom, v ktorom 5 - 10% komerčných tmavo modrých atramentov parker (parker "s superchrome modro-čierny atrament).

S touto farbou sú Gify a spory natreté v modrej farbe.

V mikroskopii sa nájdu vláknité Gify húb alebo väzbových buniek (obr. 1).

Mikroskopia teda uzatvára len o plesňovej povahe infekcie, ale nie o formulári hubového patogénu.

Samozrejme, účinnosť mikroskopického výskumu závisí od kvalifikácie laboratórneho zamestnanca.

Obr. 1. Mikroskopický odpad s nechtami postihnutými T. Rubrum. Gify sú viditeľné.

Kultúrny výskum

Vykonávať materiál siatie na štandardnej stredu Saburo, často s prísadami antibiotík. V diagnóze infekcií dermatophyte je zvykom pridávať cykloheximid do saburo média, čo je ohromujúci nárast vzdušných kontaminantov, ktorí spadajú zo vzduchu. Existujú pripravené komerčné prostredie s aditívami antibiotík a cykloheximidu. Treba pripomenúť, že mnoho foriem húb - ne-pracovník a niektoré typy Candida nerastú na médium s cykloheximidom, preto sa odporúča, aby sa siatie na SABURO v stredu s cykloheximidom a v stredu bez neho. Identifikácia druhov sa zvyčajne vykonáva s mikroskopickým štúdiom rastúcej kultúry alebo umiestnením selektívneho média (obr. 2-15).

Obr. 2. Kultúra húb T. Rubrum, izolovaná z postihnutých nechtov. Prijaté na prostredí Saburo (vľavo) a kukuričný agar (vpravo).

Obr. 3. Kultúra húb T. Mentagrophytes var. Interdigitale zdôraznil z postihnutých nechtov. V prostredí Saburo.

Obr. 4. Candida albicans huby kultúra. V prostredí Saburo.

Obr. 5. Kultúra huby Toruropsis Glabrata izolovaných z postihnutých nechtov. V prostredí Saburo.

Obr. 6. Kultúra húb je Ulokládium Sp. Zvýraznené z postihnutých nechtov.

Obr. 7. Mikrofológia Acremonium Sp. Vybrané z postihnutých nechtov.

Obr. 8. Mikromorfológia Fusarium Sp. Navštívili sa z postihnutých nechtov.

Obr. 9. Mikromorfológia Scopulariopsis sp. Vybraná z postihnutých nechtov.

Obr. 10. Candida Albicans Mikromorfológia izolovaných z postihnutých nechtov.

Obr. 11. Mikromorfológia Altemaria Sp. Izolovaná z postihnutých nechtov.

Obr. 12. Mikrofológia Aspergillus Sp. Izolovaný z postihnutých nechtov.

Obr. 13. Mikromorfológia Ulokladového SP, izolovaná z postihnutých nechtov.

Obr. 14. Mikromorfológia CHAETOMIUM SP. Izolované z postihnutých nechtov.

Obr. 15. Výživový panel pre dermatophyt identifikáciu (vľavo - Kultúra T Rubrum, Right - T Metagrofytys var. Mterdigitale).

Zľava doprava: Streda Saburo, MacKener Wednesday, CornSense, Corn Aar

Treba poznamenať, že niektoré húb formy, vrátane dermatofytov rastú v kultúre, v 2-3 týždňoch.

Dokonca aj so všetkými pravidlami pre zber materiálu, s dobrým vybavením laboratória a vysokej kvalifikácie svojich zamestnancov, počet pozitívnych výsledkov kultúry výskumu je veľmi malý.

Podľa zahraničnej literatúry, percento pozitívneho výskumu nepresahuje 50.
Percento pozitívnych výsledkov v najlepších domácich laboratóriách sotva dosiahne 30.

Tak, v 2 z každých 3 prípadov onychomikózy, nie je možné stanoviť jej etiológiu.

Luminiscenčná štúdia

V roku 1925, Margaret a Deveze zistili, že vlasy zasiahnuté niektorými dermatofytami dávajú charakteristickú žiaru v ultrafialových lúčoch vynechané cez filter RUD. Sklenené Byda pozostáva z síranu bárnatého, obsahuje približne 9% niklovoxidu; Preskočí lúče s dĺžkou 365 nm. Ako zdroj ultrafialových lúčov možno použiť rôzne zariadenia. Povaha žiarenia je určite nenainštalovaná. Vlasy naďalej svieti po smrti húb a po snahe extrahovať fluorescenčný materiál horúcou vodou alebo studeným roztokom bromidu sodného. Intenzita a povaha žiarenia závisia od pH roztoku. Predpokladá sa, že fluorescenčná látka sa objavuje v procese interakcie medzi hubami a rastúcimi vlasmi.

Žiara v ultrafialových lúčech prešlo cez drevený filter je charakterizovaný len na vlasy postihnuté hubami z mikrosporumového rodu (M. Canis, M. Audouinii, M. Ferrugineum, M. Decortium, občas M. Gypseum a M. Nanum), Rovnako ako Trichophyton Schonleinii. Microsporum-poskytnuté vlasy, najmä M. Canis a M. Audouinii, dávajú najvratnejšiu žiaru; Vlasy, postihnuté T. Schonleinii, majú dimak nazelenalý fluorescenciu.

Žiara je pozorovaná len vo vlasoch úplne postihnutých hubami. Nemusí byť v čerstvej lézii ohniská. V týchto prípadoch je potrebné odstrániť vlasy z regionálnej, najaktívnej zóny a žiara môže byť detekovaná v koreňovej časti vlasov.

Luminiscenčná metóda môže byť použitá pre diagnostiku a kontrolu nad účinnosťou liečby u jednotlivých pacientov a v epidemiologických ohniskách. Kompaktné mobilné inštalácie sú vhodné pre prieskum kontaktov v školách, materských školách atď.

Luminiscenčná skúška sa musí vyrábať v tmavej miestnosti, lézia ohniská musí byť vopred vyčistená z kôry, zvyšky masti, atď. Fluorescenčná metóda môže byť použitá na diagnostiku chybného znepokojovania, najmä pri lokalizácii lézií na pokožke hlavy. Lézie ohniská v tejto chorobe má červeno-žltú alebo hnedú žiaru. Táto žiara však nie je striktne špecifická, pretože môže byť pozorovaná v prítomnosti lupín na pokožku hlavy a dokonca aj u zdravých ľudí v oblasti ústia vlasových folikulov na tvári a hornej časti tela . Ovplyvnené vlasy identifikované pomocou luminiscenčnej metódy sa musia podrobiť mikroskopickým vyšetrením.

Immunologický a biologický výskum

Imunologické výskumné metódy sa používajú na identifikáciu špecifickej reštrukturalizácie organizmu a sérologickej diagnostiky plesňových ochorení. Na detekciu špecifických sérových protilátok sa uskutočňujú nasledujúce sérologické reakcie: aglutinácia, zrážanie, väzba komplementu, imunofluorescencia s vhodnými antigénmi.

Alergický stav tela pacienta sa deteguje pomocou alergických vzoriek kože. Alergény sa aplikujú na skarifikovanú pokožku na vrecku alebo trením do kože na moro, intradermálne na Manta, ako aj injekciu do kože. S pomocou týchto vzoriek sa odhaľujú alergické reakcie bezprostredného aj spomaleného typu, čo umožňuje odhadnúť stav humorálnej a bunkovej imunity.

Na identifikáciu špecifickej senzibilizácie lymfocytov, degranulačnej reakcie bazofilov, aglomerácií a zmien, testu výbuchovej transformácie, potlačenie migrácie makrofágov atď.

Porovnanie sérologických výsledkov a alergické reakcie Ukazuje sa, že je užitočné ako pre diagnózu a pre prognózu toku mykóz.

Biologická metóda. Používa sa na laboratórnu diagnostiku hlbokých a najmä nebezpečných mykóz. Na základe infikovania zvierat patologickým materiálom od pacienta alebo kultivácie huby v štúdii. Vykonávané v špeciálnych laboratóriách.

Histologické vyšetrenie

Histológia sľudovej kože v dôsledku dermatofytov

Patromorfologické zmeny v léziách ohniskách sú spôsobené zavedením húb v vrstve rohu epidermy, vlasov a nechtov a zápalové reakcie reakcie, ktorá môže byť akútna, subakútna alebo chronická. Diagnóza sa môže zvážiť len vtedy, ak sú prvky húb detegované v histologických prípravkoch. Na tento účel sa používa rôzne histologické farby, najviac informatívna je periodická kyselina reakcia (PAS), ktorá umožňuje identifikáciu polysacharidov, ktoré sú dostupné v celulóze a chitine bunkovej steny väčšiny dermatofytov (farba v Chif a jeho modifikácie). Môžete tiež použiť sulfatizačné reakcie a impregnáciu histologických úsekov so striebrom [Khmelnitsky O. K., 1973; Lewer W. F. a Schaumburg-Lewerl., 1983].

Huby v hornej vrstve epidermy, aj keď používajú špeciálne farby, sú detekované v malom množstve ako nite mycélia a spor. V zriedkavých prípadoch, keď existuje mnoho húb v léziách, môžu byť detegované v sekciách natretých hemotoxylínom-eozínom, vo forme jemných bazofilových štruktúr v hornej vrstve.

Zápalové zmeny v epidermis môžu byť odlišné: od nevýznamných intra-a extracelulárnych opuchových buniek na vyslovenú spongiózu. Sprgióza sa zvyčajne vyvíja počas nekybnych variantov kópií zastavenia a kefiek, klinicky, v týchto prípadoch sú uvedené bubliny. Dôvodom tejto reakcie je zvyčajne T. Mentagrophytes var. Interdigitale. Niekedy je tu vyslovená hyperkeratóza v epidermis, ktorá je najčastejšie pozorovaná v mykóze v dôsledku T. Rubrum.

Histologické zmeny v dermis sú nešpecifické a zodpovedajú akútnemu, subakusu a chronickým zápalom.

S hladkou kože s hladkou pokožkou spôsobenou T. Rubrum, huby sú niekedy odhalené v flimofických vlasoch a vlasových folikuloch. Zápalová reakcia sa vyvíja okolo folikulov, ktoré môžu vstupom do priehrady, huby môžu získať granulomatózny charakter. Centrálna časť infiltrácie v týchto prípadoch môže byť podrobená superfúčnosti a nekróze a periférne pozostávajú z lymfocytov, histocytov, epitelioidných a viacjadrových obrie buniek, vo vnútri, v ktorých sú niekedy zistené spory húb. Veľkosti spórU tu dosahujú priemer 6 μm, vo vlasoch zvyčajne nepresahujú 2 mikróny.

S infiltrative-čerpajúcou formou mykóz pokožky hlavy a oblasti rastu brada a fúzy sa prvky húb nachádzajú vo vlasovom folikule, vo vnútri a okolo vlasov. V vlasoch sú definované tesne nad zónou začiatku keratínovania (približne na úrovni 30 mikrónov). Dermis všimol zápalovú reakciu rôznych intenzity, najvýraznejšie na Kerion Celsii. V akútnej hnisavej reakcii v zložení infiltrátu sa zaznamená veľký počet neutrofilných leukocytov, prvky húb v tomto prípade môžu úplne zmiznúť. V chronickom prúde spôsobu môže infiltrát získať granulomatický charakter, v ňom sa objavujú viacjadrové obrie bunky. Ak chcete potvrdiť diagnózu v neprítomnosti húb v infiltráte, môžu sa použiť imunofluorescenčné metódy farieb. Na tieto účely sa na T. Mentagrophytes použije fluorescin označený vírusom, ktorý umožňuje detekciu antigénov húb vo vlasoch a v periónovej infiltráte.

Vytvorenie infiltratívnej cenovej kožnej reakcie v mykóze pokožky hlavy (Kerion Celsii) a oblasť rastu bradu a fúzy, vzhľadom na huby M. Sanis, T. Tonsurans a T. Verrucosum, je prejavom imunologickú odpoveď. To dokazuje:

1. sklon ohniska lézie do spontánneho rozlíšenia.

2. Nedostatok hubárskych prvkov s veľmi výraznou zápalovou reakciou z kože s mykózou spôsobenou T. verrucosum (FAVIMERE) a T. T. Tonsurans.

3. Trvalé pozitívna reakcia V reakcii na intradermálne podávanie trikooofínu s infiltrative-cennými formami Mikosa, spôsobené zoo Tricofids (napríklad T. Tonsurans) a negatívny - s povrchovými metódami spôsobenými rovnakými T. t. tonsurans.

S Favusom v vrstve horniny epidermy sa nachádza veľký počet baní mycélia a jednotlivých spór húb. Scoundula je reprezentovaný exsudátom, Sparkierotickými bunkami epidermy, buniek zápalového infiltru, ako aj roztočových vlákien a húb spor, ktoré sú umiestnené hlavne v periférnej zóne lopatky. V aktívnej fáze ochorenia v dermis okolo degeneratívnych vlasových folikulov, existuje výrazná zápalová infiltrácia obsahujúca viacjadrové obrie a plazmatické bunky. V starých ohniskách lézií chýbajú vlasy a mazové žľazy, existujú fenomény fibrózy.

Histológia sľudov pokožky a slizníc spôsobených hustomerskými hubami

V Candida pokožky a slizníc sa huby rodu Candida nachádzajú v vrstve rohu epidermy alebo v povrchových vrstvách epitelu sliznice. Prvky húb sú zvyčajne malé, sú dobre zafarbené pasšovacím alebo v gram; Prezentované vo forme vlákna septického vetvenia mycélia, vo veľkosti 2-4 μm v priemere, alebo oválne spory, priemer 3 - 5 um v priemere. Diagnostická hodnota je detekcia formy Murcia.

S histologickým vyšetrením chronickej granulomatóznej kandidózy kože a slizníc sa prvky húb výhodne nachádzajú aj v vrstve rohu epidermy alebo najviac horné oddelenia Epitel sliznice, ale niekedy v peelingovej vrstve, vo vlasoch a v dermis. Tam je tiež výrazná hyperkeratóza a papillomatóza; V dermis - hrubá zápalová infiltrácia pozostávajúca z lymfoidných buniek, neutrofilov, plazmy a multi-jadrových obrovských buniek. Infiltrát sa môže šíriť na subkutánne tukové tkanivo.

S miskou epidermis, veľký počet hríbových prvkov vo forme jemných bazofilových štruktúr, ktoré sú jasne viditeľné aj pri farbe hemotoxylínu-eozínu, sa nachádzajú v hornbar. Huby sú prezentované oboma vláknami a spormi.

V folikulovej forme ohniska je páka pozorovaná akumuláciou nadržaných hmôt a buniek zápalového infiltru v rozšírených ústach vlasových folikulov. Zápalová infiltrácia je tiež zaznamenaná okolo folikulov. S PAS reakciou, sférickými alebo oválnymi spórami huby, merania 2-4 μm v priemere, ktoré sa nachádzajú vo vnútri ústia vlasových folikulov a niekedy v peripollikulárnom infiltráte. Mycelium sa nikdy nezistí.

Porušenie kožných pigmentácií u pacientov s neohrečeným zbaveným z dôvodu schopnosti húb PityRosporum s látkou, ktorá utláča proces tvorby pigmentu v epiderme. Štúdium elektrónovej mikroskopickej štúdie kože biopsie s hypocygnitovanými miestami ukázali, že v melanocytoch sa vytvárajú veľmi malé melanocyty, ktoré nie sú schopné preniknúť do keratinocytov. V hyperpigmentovaných oblastiach kože, naopak, melanosomes sú veľké a obsahujú veľké množstvo melanínu.

Hlavný v etiologickej laboratóriu diagnózy mykóz k dnešnému dňu, klasické metódy naďalej pokračovať, vrátane materiálovej mikroskopie, pričom výber čistej kultúry patogénu, po ktorom nasleduje jeho identifikácia. Imunologické diagnostické metódy majú pomocnú hodnotu. Používajú sa na identifikáciu najvýznamnejších patogénov: patogénnych dimorfóznych húb, ako aj kauzálnych činidiel kryptocózy, kandidózy a Aspergilleze. Spôsoby znázornenia génu (polymerázová reťazová reakcia) majú tiež obmedzené použitie v dôsledku ich nedostatočnej špecifickosti, ale používajú sa hlavne v diagnostike hlbokých a oportúnnych mykóz.

Materiál na štúdium s laboratórnou diagnózou mykóz, v závislosti od tvaru ochorenia, môže byť: koža a jeho prívesky (vlasy, nechty), oddelené ranymi a fistuly, spúta, krv, alkoholu a moču, tkanivová biopsia. Správnosť prijímania patologického materiálu je vo veľkej miere určená účinnosťou ďalšieho laboratórneho výskumu. Pod kožnými léziami je materiál najčastejšie zvolený spôsob škrabania alebo pomocou lepkavej pásky (hlavne na povrchových formách) pred liečbou čerstvých, ale plne vyvinutých ohniskách na okraji, kde sa nachádzajú najviac životaschopné patogény.

Keď sa detegujú huby dermatofyt, vlasy sú veľmi informatívne, pretože charakter poškodenia vlasov vám umožňuje identifikovať patogén. Definícia zamerania na léziu v niektorých prípadoch pomáha pri používaní drevenej lampy. Postihnuté vlasy spolu so stupnicami sa extrahujú epilačnými pinzetami. V chronickej triotickej triotike Black Trico sa vlasy odstránia z kože s predplatenou ihlou.

Klince sú vybrané v celej vrstve, odrezané ostré skalpel alebo nožnice. Účinnejší výber pomocou zubnej kefky. S léziou kandidátov sa materiál zvolený s použitím rozsahu od valčeka na nechty. Vybraný materiál sa dodáva do laboratória v tmavých papierových vreckách, aby sa zabránilo sušeniu a kontaminácii s cudzími mikroflórami. Materiál obsahujúci hnis je dodávaný v sterilných baptíkoch alebo Petriho miskách. Spúta je vybraná v sterilných riadoch. Mokrý výskum by sa mal vykonávať najneskôr 2 hodiny po zbere. Pri predĺžení expanzie štúdie by sa vzorky mali skladovať v chladničke pri + 4 ° C, inak sa môžu vyskytnúť diagnostické chyby spojené s výskytom pseudomycelových foriem kvasinkových buniek.

Krv a miechová tekutina sú vybrané v súlade s aseptickými pravidlami. Siatie krvi sa vykonáva v kvapalnom médiu Sabulu. Na odstránenie kontaminácie vzoriek krvi sa vykonáva ich opakovaný výskum. Chrbtica Centrifugované a zrazenina sa používa na mikroskopické a siatie.

Moč sa vyberie ráno v sterilných riadu, pričom je potrebné vyhnúť sa znečisteniu materiálu pokožky mikroflóry rozkroku. Zníženie moču sa vykonáva pomocou kvantitatívnych metód siatia.

Pri diagnostike mykóz sa prípravky používajú z natívneho materiálu a natretého. V štúdii nenatiežených liekov je hustý materiál predinmelený (mAcery) 10-30% con (roztoky sulfoxidu dimetyl) a potom mikroskopický s použitím "drveného poklesu" metódy. Na dodržanie kontrastu sa prípravky obviňovali vodným roztokom metylénovej modrej.

Farba fixných škvŕn sa vykonáva rôznymi spôsobmi: z hľadiska gramu, metylénovej modrej podľa Romanovského - posilňovne. Posledná metóda vám umožní vidieť malé kvasinkové bunky a kroky fagocytózy. Pre kryptococci používajte sfarbenie atramentu, maľovanie s Mudskamine v Soutgeit. Huby obsahujúce melanín (tmavo sfarbené), napríklad Cladophialophora Bandana., zafarbená hmotnosťou - fontána (maľba melanínu, ktorá je súčasťou bunkovej steny). Fluorescenčné sérum sa používajú v diagnóze hlbšej sľudové patogény, dermatophyatofyte patogény, originálne Candida.

Výber čistej kultúry patogénu umožňuje stanoviť generické a druhové príslušnosti huby, študovať jeho vlastnosti a citlivosť na antimikrobiálne lieky. Na pridelenie a identifikáciu húb sa používajú husté a tekuté živiny médiá, suslo-agar. Tieto médiá zabezpečujú rast najviac patogénnych a podmienečne patogénnych húb. Okrem toho sa prostredie Saburo (obr. 8.2) stimuluje procesy tvorby pigmentov v húb, ktoré záleží pri identifikácii.

Antibiotiká sa pridávajú k potlačeniu rastu kontaminantov baktérií v médiu: belientomycetín, streptomycín, penicilín, tetracyklín. Na izoláciu náladových patogénnych húb sa používajú médiá obohatené krvou a kardiovaskulárnym extraktom. Špeciálne médiá sa používajú na pestovanie a identifikáciu húb: Cape Streda - pre tvorbu konídia pri identifikácii foriem húb, zemiakov (zemiakov) agar, ryžový agar - na identifikáciu typov rastu a prijímanie chlamydospore pri identifikácii húb rodu Candida., mrkva (zeleninový) agar - získať typické kolónie kultúry huby Trichophyton Schonleini, Cashkin Streda - na zvýraznenie húb s pigmentom. Používajú sa napríklad diferenciálne diagnostické médium na identifikáciu C. albicans - Chromogénne médium alebo médium na stanovenie aktivity fosfolipázy huby.

Časová inkubácia húb je od niekoľkých dní do 1 mesiaca a viac. S podozrivými patogénnymi dimorfóznymi hubami na vydávanie negatívnej odozvy sa kultivácia uskutočňuje počas 8 týždňov.

Sowings sa vykonávajú na médiách, rozliate na skúmané rúry, fľaše a Petriho riadu. Materiálne plodiny na dermatofyphyphyphyphyphit huby sa vykonávajú súčasne niekoľkými trubicami s médiom. Materiály podozrivé na obsah húb foriem (mokré) sú zasiate v 3 bodoch a inkubované pri 28 a 37 ° C. Vyriešiť otázku absencie kontaminácie v plotom materiálu, riadiacich systémov vzduchu pri udržiavaní húb foriem v priestoroch laboratória a komôr, kde sa nachádzajú pacienti.

Pri pestovaní húb v mikrologickom laboratóriu sú bezpečnostné opatrenia pozorované podobné tým, ktorí sú v bakteriologických laboratóriách. Práca s hustými formami a mykotoxíny, aby sa zabránilo alergys, personál vykonáva v bauxovaných miestnostiach v gázových obväzoch alebo v tabuľkových boxoch s extraktorom. Práca s kultúrami patriacimi do II skupiny patogenita (patogénne dimorfné huby) je možné len v špecializovaných laboratóriách.

Identifikácia typov húb sa vykonáva na základe komplexu kultúry, morfologických a iných značiek. Prvý prvé zahŕňa morfológiu kolónie, jeho maľovanie a veľkosť kultivácie v špeciálnych prostrediach, štruktúra regiónu a centra, povaha povrchu, prítomnosť a povaha reprodukčných orgánov, na druhú znak Mikroskopická štruktúra mycélia, štruktúry, tvaru a veľkosti reprodukčných orgánov - konfijné sedadlá, koncipciu, chlamydospore, Artrospore atď.

Huby tvoria rôzne typy kolónií na hustých živinách. Vedci z Ústavu Venther (USA), vzhľadom na schopnosť húb prideliť pigmentové látky v stredu, vytvorili "Nový rok vianočný strom" v živnom médiu (obr. 8.3).

Obr. 8.3. "Nový rok" z húb (top: Talaromyces stipitatus.; \\ T drevo Aspergillus Nidulans;dekorácie: Penicillium Marneffei; pňa: Aspergillus terreus)

Enzymatické a asimilatívne kultúry majú veľký význam Pri identifikácii kvasiniek (huby podobné kvasinky). V súčasnosti sa používajú komerčné testovacie systémy na identifikáciu bežných húb - kauzačných činidiel: bbl mycotube, API 20C BIO MERIEUX, atď.