Grybelinės ligų laboratorijos diagnostikos vaidmuo. Laboratorinė diagnostika Mycozės * Mano dermatologija

4402 0

Deja, ir šiuo metu galima teigti, kad grybelinių ligų diagnozė dažnai yra nepagrįsta (kūno suskirstymo zonos, lupimas dažnai priimamas "pleiskanų", "sausai"). Tuo pačiu metu subjektyvūs pojūčiai (niežulys, skausmas ir kt.) Dažnai nėra ten, o pacientai yra dėl to ilgam laikui Negalima kreiptis į specialistą.

Pokyčiai nagai (negraži, krumbia, skiedžiama) yra laikomi "oniodstrofija" po žalos, užšalimo ir tt tuo pačiu metu (net izoliuoti pažeidimai, beje) gali sukelti alerginio kūno restruktūrizavimo formavimas, įtakos kraujo ir limfiniai laivai ir kt. Pacientai tuo pačiu metu lieka grybelinės infekcijos plitimo šaltinis. Atsižvelgiant į tai, kas išdėstyta pirmiau, savalaikė laboratorinė diagnozė mikozių yra savalaikė laboratorinė diagnostika diagnozė, ankstyvo gydymo elgesys.

Klinikinių grybelinių ligų variantų įvairovė, pageidautina randama žmonėms, taip pat mikrobiologijos, morfostruktūrų, imunologinių ir kitų įvairių grybų tipų (ir genčių) parametrų ypatybės lėmė didelį diagnostinių diagnostinių mikozių diagnostinių metodų buvimą; Pažymėtina, kad esami metodai yra nuolat tobulinami ir (palyginti neseniai) turi tokį šališkumą imunologiniais ir molekuliniais genetiniais bandymais.

Kita vertus, kultūriniai tyrimai ir iki šiol "yra standartų arti aukso" ir yra naudojami patvirtinti abejotinus kitų tyrimų rezultatus; Manoma, kad kultūrinių ir molekulinių genetinių metodų derinys su "abejotinu" diagnostikos plane diagnostiniu planu diagnostiniu planu (ypač platinamas bet kokio genezės imunosupresijos fone, su vidaus organų pralaimėjimu ir tt) yra Vienas iš patikimiausių būdų užregistruoti proceso pobūdį.

Tačiau nepaisyti "senų" metodų, ypač bakterioskopijos (ypač apklausos apklausa), ypač nuo kasdieninės praktikos, mikroskopinio "tikrinimo" mikrosa daugelyje dermatologinių institucijų yra plačiausiai palyginti su kitais bandymais.

Atsižvelgiant į didelį alerginių apraiškų ant odos (ir kartais visceral) skaičius - su ilga, lėtine, periodiškai pablogina mikozės srautą (odos, nagai ir tt), patartina deklaruoti alergologinius tyrimus, leisti nustatyti kūno jautrinimo laipsnį, įskaitant sujungtą grybelinę bakterinę infekciją; Šis faktas gali turėti įtakos gydymo specifikacijoms tam tikrame paciente - lemia racionalų antimicotikų ir desensizing agentų tikslą ir kt.

Tradiciškai ginčijama grybelių liga diagnozuojama remiantis klinikiniais pasireiškimais ir patvirtinama laboratoriniais tyrimais.

Šiame knygos skyriuje trumpai pateikiame pagrindinius mikozių registravimo metodus (nepaisant jų lokalizacijos), atsižvelgiant į "mokslinių tyrimų tipą ir medžiagą". Pažymėtina, kad mikozių klinikinių apraiškų polimorfizmas (įskaitant alerginį komponentą) sukelia įvairią patologinę medžiagą, kurią reikia ištirti. Tuo pačiu metu grybelio elementų paieškos sėkmė priklauso nuo teisingo.

Taigi, iš periferinė zona eriemo-slydo, dažnai suprato bėrimas yra turtingas micelium, grybų ginčai; Dėl plaukuotų pažeidimo vietų, sužadintos, baltos, spalvos, nuobodu plaukai ar jų fragmentai yra paimti - "kanapių" (plaukų tvora patartina kontroliuoti medienos žibintą). Tam tikri įgūdžiai reikalauja medžiagos tvoros (naudojant adatą) nuo vadinamojo. "Juodieji taškai" - tamsūs raginiai spurgai folikulų burnoje.

Kasdieninėje praktikoje odos svarstyklės paprastai yra ištirtos (sumontuotos į grandinę, tepti, naudojant lipnią juostą), nubraižyti modifikuotus nagus, slopinančių hiperkeratozės zoną, taip pat atskirtas gleivines. Pasak liudijimo, skreplių, lavinio skysčio, šlapimo (pacientams, sergantiems noncateried šlapimo pūslė); Laistymas iš šlapimo, pamušalo laivų negalima atlikti tyrimams.

Kraujas (kultūros tyrimams, taip pat IFA, PCR), alkoholiniai gėrimai ir kiti organizmo bioilėms (pleuros, intra-intraperitoninė - suvestinama. Surinkta aspiracijos ar drenažo); Kai kuriais atvejais (priklausomai nuo aktualios diagnostikos), tulžies, išmatos yra svarbios, po oda absceso taškai, atskirti fistulais (ypač su giliu Mikosakh). Net nesudėtingi diagnostiniai tyrimai reikalauja tiksliai laikomasi tam tikrų sąlygų.

Metodai šiuo metu kreipiasi dėl grybelinių ligų diagnozės:
- mikroskopija; Remiantis nustatytu patogenu esančioje medžiagoje pagal tyrimą, įsk. žmogaus audiniuose;
- kultūros tyrimas su vėlesniu grybų kultūros mikroskopiniu tyrimu;
- histologinis tyrimas (G.O. su giliu MIKOSAH);
- Imuninė ir molekuliniai metodai.

Mikroskopinė diagnostika

Mikroskopinė diagnostika apima neatidėliotinų (gimtoji) ir dažytų vaistų tyrimą. Šis metodas, kaip pažymėtas, yra labiausiai paplitęs dermatologinėje praktikoje dėl lyginamosios negalios ir mažos kainos, tačiau, kita vertus, jis nėra pakankamai jautrus, reikalauja iš dalies pakartotinių bandymų, patvirtinančių kitus metodus.

Taigi, neaustų narkotikų tyrime, be grybelio elementų, galima aptikti epitelocitus, kraujo ląsteles, įvairius užterštumą išorinė aplinkaKas yra sunku ieškoti priežastinio agento MIKOSA, reikalauja papildomą "paruošimą" medžiagos - vadinamąjį. "Apšvietimas" iš jo (maceracijos), koncentracijos, praskiedimo ir kt.

Tačiau tiesioginis gimtojo narkotikų mikroskopija leidžia greitai diagnozuoti mikozę, nustatyti, kokia mitybos laikmena (jei reikia) medžiaga turėtų būti konfiskuota, yra nuomonė, kad jo teigiamas rezultatas gali išlikti vieninteliu laboratorijos patvirtinimu MIKOSA su neigiamu atsaku į kultūrą ( A.YU. SERGEEV, YU.V. SERGEEV, 2003).

Tarp įvairių narkotikų "apšvietimų" variantų dažniausiai yra pridėti prie tyrimo ar Naono medžiagos (dažnai naudojama odos dribsnių grybams aptikti plaukus, taip pat gilesnę mikaozės patogeną skrepliai , biopsyats).

Smulkintos ir dedamos ant objekto stiklo, svarstyklės atliekamos 10-20% šarminis soda (arba kalio) - 1-3 lašai 10-20 minučių; Vaistas yra šiek tiek nuspaustas su stiklo danga, greičiau mažinant ant liepsnos, kol pasirodys garai. Pirmą kartą peržiūrint po nedideliu padidinimu, tada didele (sausa sistema).

Tinkamai paruoštas vaistas, netaikomas šiurkščiavilnių mechaniniams, šiluminiams ir cheminiams poveikiams, yra vienodos masės, susidedančios iš epitelocitų, mielium grybų elementų, ir ginčų elementų.

Modifikuoti plaukai dedami ant skaidrės su 10-30% šarmais ir yra traktuojami tuo pačiu metodu, bet ilgiau - nuo 20 minučių iki 3-4 valandų. Su gausiu pigmento kiekiu, rekomenduojama iš anksto išbandyti plaukus 5% vandenilio peroksido tirpalas. Paspauskite grybų elementų aptikimo vertę, taip pat jų vietą plaukams.

Medžiagos paruošimas iš patologiškai pakeistų nagų (geresni ploni milteliai, gaunami iš židinio gylio), bet naudojant 30% kaustinės sodos, privalomas atsargus šildymas ant liepsnos į šviesą garai ir poveikis apie 1c (kartais iki kelių valandų). Preparatai, gydomi šarmais, negali būti saugomi daugiau kaip 1,5 metrų dėl jų "žalos" (reagento kristalizacija, nustatyto mikroskopinio modelio diagnostinio patikimumo sumažėjimas).

Vietoj con arba vidurdienio, jis gali būti naudojamas: a) policininko mišinio tirpalas su 15% DMSO; b) fenolio (2 dalių) mišinys su chloralhidratu (2 dalimis) ir pieno rūgštimi (1 dalimi); c) balta kalnų balta, turintys higi ir šulinių ir celiuliozės baimę; Tyrimui reikalingas luminescencinis mikroskopas (yra mėlyna arba žalia švyti, kuri priklauso nuo delivio filtro). Alkoholinio gėrimo tyrime (su įtarimu dėl kriptococozės) dažnai buvo naudojamas tapyba su automobiliu.

Kulag V.V., Romanenko I.M., Afonin S.L., Kulag s.m.

Grybelinių ligų diagnostikos pagrindas yra mikroskopinis narkotikų tyrimas, paruoštas nuo paveiktos odos ir nagų. Tačiau mikroskopinis paveikslėlis skirtingų tipų mikozių yra panašios: sporų grybų ir šakotosios septinės mūzos su 4-7 mkm skersmens yra matomi odos svarstyklės ir nagai. Todėl grybų gentis ir rūšies daugeliu atvejų negalima nustatyti ant mikroskopinio paveikslėlio odos skalėse arba iš nago. Norėdami nustatyti patogeną, pasėliai atliekami maistinių medžiagų laikmenose, dažniausiai Saburo trečiadienį.

Epidermofilation.Stenklinis odos sluoksnis yra paveiktas, dažniausiai sustoja, o apatinių galūnių nagai. Plaukai niekada nenuostabu. Geltonos dėmės arba juostos atsiranda ant nagų, tada hiperkeratozė (nagų sutirštinimas) vystosi, jų deformacija ir sunaikinimas. Odos stotelėje yra plokščių šveitimo padai ir interpiln lorls, paraudimas. Kartais burbuliukai, skersmenys, įtrūkimai yra suformuoti. Liga lydi niežulys, deginimas, skausmas.

Su mikroskopiniu tyrimu laužo, laužas, burbulų padangas nustatomas mažos ašies sriegis micelium su 3-5 mm skersmens, dalis siūlų patenka į apvalius ir stačiakampius ginčus.

Trikhofizija.Tai grybelinė odos liga ir jos priedai su ypatinga tendencija paspausti savo plaukus [lat. trichos. Plaukai +. phyton. grybelis]. Ant galvos odos atsiranda daugelio 1,5 cm skersmens. Oda ant jų yra edema, hipereminė, padengta svarstyklėmis. "Foci" plaukai yra sukniedami 2-3 mm lygiu virš odos paviršiaus, iš kur ir pavadinimas "Striging netenka".

Mikroskopinis tyrimas atskleidžia būdingą Trejofitono tipo grybų bruožą - jų ginčo su grandinėmis išdėstymas. Priklausomai nuo grybų savybių atskirti:

Endothrix (paviršinio triko patogenui). Grybai auga plaukų viduje dramatiškai keičiasi savo struktūrą. Visi plaukai yra užpildyti (išpūsti) su lygiagrečiomis grandinių eilėmis, susidedančiomis iš didelių apvalių ar kvadratinių ginčų;

Ectothrix (giliai triko patogumui), kuriame plaukai yra apgaubti mažų ar didelių argumentų, esančių palei ašių grandines.

Favus - Parsh.Plaukai ir oda yra paveikta, mažiau dažnai - nagai. Plaukai tampa subtilūs, nuobodu, "plaukimas", kaip ir senovės perukai, bet ne fluteded. Odos pažeidimui, geltonos pilkos plutos (atvartų) išvaizda su pakeltais, kaip ir šonais, kraštais.

Su mikroskopiniu tyrimu aptinkami oro burbuliukai.

Microsporia.Atidaromi odai ir plaukai. Atsižvelgiant į pažeidimą, plaukai yra apvalinti 6-8 mm virš odos paviršiaus. Baltieji dangčiai pastebimi aplink likusius kanapius.

Su mikroskopiniu tyrimu nukentėjusiems plaukams, ginčai matomi, esantys aplink ir viduje plaukų mozaika (atsitiktinai). Jie yra labai maži (1-3mm), taigi liga. Mikratorių diagnozė padeda charakteristikų luminescencinės plaukų luminescenciją.

Kai mikroskopinis tyrimas, suapvalintos suapvalintos ląstelės yra rasti, dažnai vynuogių klasterio pavidalu.

Giliai (pelėsių) mycoses.Dažniau randami kaip profesinės ligos įmonėse dėl antibiotikų gamybai, žemės ūkio darbuotojams, kurie liečiasi su pelėsių grūdais, šienais, kompostu ir kt. Penicilliozės (grybų grybų) priežastinis agentas turi grubų, platų, septikų, baigiant šepečiu. Mulkos sukėlėjas turi platų nebaigtą mielium su maišeliu su ginčais. Aspergilleza (formuoto pelėsių) sukėlėjas dažnai randamas ant pelėsių vaisių, duonos. Jis turi neapdorotą septinį grybelį, kuris baigiasi su išplėtimu, nuo kurios siūlai su ginčais primena vandenį, galima primena.

Aktinomikozė. Sukelia įvairių tipų spinduliavimo grybelis. Jis pasižymi odos, gleivinės ir tankių infiltratų vidaus organų formavimu, linkusi į pateiktą ir fistulių atsiradimą. Maži geltoni grūdai su būdingu spinduliuojančiu kraštu yra matomi į akį į Fistulas nuotekų - Actinomycet's Dubby. Mikroskopijos preparatai paruošiami iš atskirtų fistulės ir skreplių.

Su nedideliu spinduliavimo grybelio viršutiniu padidėjimu yra gelsvos apvalios formos su šviesiai amorfine vidurine ir tamsesne spalva aplink kraštus. Su dideliu padidėjimu dubo centre, nustatomi Mielės siūlai, ir periferijoje - skonio patinusi. Kai tapyba "Mycelium R +" ir "Kolkovka" g- g-.

Laboratorinė diagnostika Grybelinės ligos yra pagrįstos grybelio aptikimu ir jo rūšies ir tipo apibrėžimu. Jį sudaro du pagrindiniai etapai: mikroskopiniai ir kultūriniai tyrimai.

Mikroskopinis tyrimas

Mikroskopinis tyrimas yra pirmasis ir svarbus ryšys, leidžiantis patvirtinti preliminarią diagnozę.

Mikroskopinio tyrimo sėkmė labai priklauso nuo tinkamos patologinės medžiagos tvoros. Mikroskopiniam tyrimui būtina pasirinkti plaukus, turinčius begalinius pažeidimų grybų požymius (nuobodu, sulaužytas, sutirštintas). Pakeistas į išvaizdą plaukų pašalinti epilatory pinkerai. Norėdami aptikti vieną nustebinti plaukus su "Microsporia", galite naudoti fluorescencinę lempą su medienos filtru (žalsvai mėlyna spalva).

Siekiant nustebinti plaukai, galite naudoti keletą papildomų funkcijų. Plaukai nukentėjo nuo Microsporo, prie pagrindo, turi pilkąjį aprangos ginčo atvejį. Lėtiniu trikniku į svarstyklių storis, trumpi pilkai yra išlenkta "kableliais" ir "apklausų ženklų" paveiktų plaukų, taip pat "juodi taškai" (sutirštėjęs juodas, gimęs folikulų lūpų nustebinti plaukai) . Su infiltraciniu-arogantišku triotietika mikroskopiniam tyrimui, išskyrus nukentėjusius plaukus, galite naudoti PUS ir plutos iš pažeidimo dėmesio.

Nuo odos pažeidimų židinio, tricchy ir micozės dribsnių ir micozės dribsnių, būtina nuvalyti iš periferinės zonos pažeidimo, kur grybelis yra daugiau. Plaukai su odos svarstyklėmis.

Nuostabų plaukų metu Microsporijos ir tricochy metu atkreipiamas dėmesys į ginčo išdėstymo ypatumus (plaukų viduje arba už jos ribų) ir jų dydį. Šie duomenys leidžia kai kuriais atvejais paaiškinti diagnozę, klinikinė forma MIKOSA IR EPIDEMIOLOGIJA.

Su sąveika forma MIKOSA sustabdyti mikroskopinių tyrimų naudoja odos dribsnius ir fragmentus Macery-Rog sluoksnio. Nagų sekcija, kurią reikia imtis mikroskopiniam tyrimui priklauso nuo onichomikozės formos. Su paviršutiniška forma, jums reikia nubraukti nuo nagų plokštės paviršiaus.

Naudojant dažniausiai distalinę šoninę formą, nuleidimas nuo nagų lovos, nuo po plokštės (hiperkeratozės) su dalies pakeista nagų plokštele. Naudojant proksimalinį papročio formą medžiagos tvorai, naudojami specialūs metodai (gręžti langai su Bormer, nagų biopsija).

Su "Mikosa" stabdymo slopinimo skalės nuo plyšio iš plyšių. Su mikoozės išleidimo forma, burbuliukai padangos yra supjaustyti tyrimui.

Medžiagos paruošimo įranga mikroskopiniams plaukams tyrimams . Mažas 30% con ir numatomų plaukų yra ant stiklo paviršiaus stiklo ir vakuualinės adatos. Plaukų lašas yra šiek tiek pašildytas alkoholio liepsna, kol garai pasirodys virš skysčio paviršiaus ar kristalų ratlankio paviršiaus išilgai šarminio kritimo krašto. Dengiant dengtą stiklą, šarminis perteklius pašalinamas filtro popieriumi. Vaistas ištirtas pirmiausia mažais, o po to mikroskopo padidėjimas (x 400) padidėja.

Odos ir nagų svarstyklės . Ploni nagų dribsniai mikroskopiniams tyrimams dedami ant slydimo į 30% con ir šildomas pridedant šarmiją garinimo metu. Atvėsintas nešvankus vaistas yra padengtas stiklu ir mikroskopu.

Storas odos ir nagų dribsniai dedami į centrifugos mėgintuvėlį ir pilamas su keliais lašais 30%. Vamzdis yra šildomas virti ir palikti 20-30 minučių. Iš minkštintos medžiagos gabalas su stiklo lazda perduodama į skaidrę, paspaudus rungtynes \u200b\u200bprieš "debesies" išvaizdą, po kurio mikroskopija.

Pūliai . PUS lašas sumaišomas su alkoholio lašeliu per pusę su glicerinu ir yra tiriamas vietiniu paruošimu.

Kultūrinė diagnozė

Kultūrinė diagnostika atliekama galutiniam diagnozės ir aiškinančios epidemiologijos paaiškinimui. Ji apima grybų kultūros gamybą su vėlesniu mikroskopiniu tyrimu.

Nuostabūs plaukai, svarstyklės (odos ir nagų), burbuliukai padangos ar pūlingas patenka į dirbtinę maistinių medžiagų terpę. Atsižvelgiant į milžiniškų kolonijų dėl Petri patiekalų išvaizda, jūs galite padaryti patogeno būdas (Microsporum, Trichophyton, epidermophyton, jo forma (L. Canis arba Ferrugineum, T. Pleaceum, Verrucosum arba Gypsum) idėją. Galutinis grybelio genties ir tipo tobulinimas yra įmanomas tik remiantis gautos kultūros mikroskopiniu tyrimu.

Laboratorinė diagnostika paviršiaus kandidozė

Laboratoriniams tyrimams mielių panašūs grybai, reikalingas šviežia medžiaga. Mikroskopiniam tyrimui, priklausomai nuo klinikinių apraiškų ir pažeidimų lokalizavimo, odos dribsniai gali būti imami, laužas nuo nagų, pūlių lašas nuo nagų voleliu, baltos reidos iš nukentėjusių burnos gleivinės plotų ir išorinės lyties organų Organai, makšties sienos, nubraižyti su gleivinės šlaplės lukštais, taip pat plaunant raudoną lūpų sieną, nustebino didelių ir mažų raukšlių odos sritis.

Priklausomai nuo pralaimėjimo vietos ir klinikinių apraiškų pobūdžio, tyrimo medžiagai imamasi medvilnės tamponu, skalpeliu, kilpa ir pan. Odos ir nagų dribsniai, epidermio ir gleivinės šlaitų laužai yra iš anksto apdoroti su 30% con. Patologinė medžiaga tiriama neatidėliotinais ar dažytais vaistais.

Pirmuoju atveju medžiaga sumaišoma su vienodo alkoholio kiekiu glicerinu. Kai tapyba gramo, mielių ląstelių ir pseudomyties atrodo tamsiai violetinė, palei Cylu-Nielsen - mėlyna, ir Romanovsky-Gymn - Pink-violetinė. Tuo pačiu metu savitas mielių ląstelių bruožas yra juokingas - "smėlio laikrodžio" formos atradimas. Medžiaga iš burnos ertmės gleivinės, lyties organų, nuo raudonosios sienos odos lūpų odos, nuo burnos kampų, nuo didelių ir mažų raukšlių odos yra atliekamas su steriliu tamponu. Tamponas po medžiagos paėmimo dedamas į kitą sterilų vamzdelį su skystu. Bandomasis vamzdis su tamponu siunčiamas į mikrobiologinę laboratoriją. Grynos mielių Candidos grybų kultūros išleidimas atliekamas pagal visuotinai priimtą mikrobiologinę techniką.

Laboratorinė diagnostika Mycozės

Medžiaga laboratoriniams tyrimams grybai.

1. SOST 42-21-2-854: įsakymas Nr. 222/80 27.06.00
2. Įsteigimas: pincetas, stiklai, žirklės, folkman šaukštas.
4. Rodyti: grybelinės ligos.
5. Dalykai: Ne.

Procedūrinio biuro rengimas:

Sprendimų keitimas.

Virėjas
-1% RR chloro veterinarai
-3% RR chloras - dezinfekuotiems tvarsliams ir tweezers
- valymas RR. (156 ml. Vandenilio peroksidas + 5 g. Ploviklių milteliai + 839 ml. Atskleisti vandenį) - perdirbimui pincetas
- 6% r-r pense Vandenilis - perdirbimo pirštines.

Manipuliavimo atlikimo algoritmas.

Jums reikia imtis pincetų, stiklo, šaukšto liaudies, žirklės;
- Pacientas kviečia į apsirengimą;
- pacientas sėdi ant kėdės ar sofos;
- m / s stovi.

Vykdymo technika:

Nuo pažeidimo dėmesio į pinklį, kad būtų imtasi odos ir plaukų svarstyklės;
- Paimta medžiaga, įdėta ant skaidrių ir arti kito dydžio stiklo.
- Nuplaukite rankas su muilu;
- Siųsti medžiagą siųsti į laboratoriją.

Medžiagos kolekcija

Paimkite žirkles ir skaidres;
- išjunkite gabalėlį iš laisvos nago krašto;
- paimta medžiaga, skirta padengti kito dydžio stiklu;

Žirklės ir pincetai mirksi 3% formalino tirpalu.

Teisinga kolekcija medžiagos iš paveiktų nagų yra raktas į sėkmingų mikrobiologinių tyrimų. Atsižvelgiant į medžiagą, ne visada užfiksuokite nagų vietoves, kuriose yra gyvybingų grybų. Žinoma, nekilnojamojo kultūros grybai nekils, ir jie negali būti įdiegti.

Nagų sklypas, kuris turi būti priimtas, nustatomas onchomikozės forma.

Taigi, su onchomikozės paviršiaus forma, scurzes turi būti pagamintas iš nagų plokštės paviršiaus.

Su labiausiai paplitusi distalinė Subcas forma, gyviausi grybai yra po nagų plokštės. Medžiaga, kuri yra orientuota į tyrimą, turėtų apimti ne tik nagų plokštės apipjaustymą, bet ir nubraukimą nuo nagų lovos, nuo plokštės.

Be to, nereikėtų užfiksuoti nepakitusių nagų sritys, nes aktyviausi grybai yra ant jų sienos ir paveikė nagų vietas.

Su proksimaliniu pogrupiu forma, medžiaga yra sudėtinga. Tokiais atvejais kartais, ypač jei histologinis tyrimas vyks arba diferencinė diagnozė, Nagų biopsija, retkarčiais, naudokite Bormshina.

Su Paronichs daro svarstykles nuo proksimalinio volo ir nuo jo.

Visais atvejais, kad būtų išvengta bakterijų užteršimo, mėginys turi būti gydomas etilo alkoholiu.

Mikroskopinis tyrimas

Mikroskopinis tylos medžiagos tyrimas ant grybų gaminamas gimtoji ir dažytos narkotikų.

Nukentėjusių vaistų paruošimui, gauta medžiaga šlifuoja su skalpeliu arba vakuer adata ir dedamas ant skaidrių stiklo viduryje. Dėl aiškesnio identifikavimo elementų grybelis, apšvietimas (maceravimo) medžiagos yra pagamintas. Šiuo tikslu jis kreipiamasi į įvairių medžiagų pagalba, dažniausiai su šarmais valgyti (CON, NaOH), kuris ištirpintų epidermio dribsnius, gleives, pūlius, apšviesti plaukų pigmentą ir taip atlieka grybus moksliniams tyrimams.

Ant minkštintos odos arba nagų dribsnių, kurie yra dedami ant skaidrių stiklo viduryje, sukelia 1-3 lašus nuo 20 iki 30% CON (NAOH) tirpalo. Medžiaga, pagal tyrimą šarminių lašais švelniai šildoma alkoholio liepsna iki subtilaus baltojo ratlankio nuo šarminių kristalų ant kritimo periferijoje. Jis neturėtų būti šiltas iki virimo. Po šildymo lašas yra padengtas stiklu, vengiant oro burbuliukų.

R. A. Arabijos ir G. G. Gorshkova (1995) rekomenduoja apšviesti ir padengti odos laužo stiklą ir plaukus palikti 5-10 min., Ir nagų plokštės - 30 - 40 minučių iki mikroskopikacijos.

Narkotikų apšvietimas gali būti atliekamas be šildymo, nes jie paliekami 20% CON tirpalu 30-60 minučių arba naudoti kitus patologinės medžiagos apšvietimo metodus: chlorallactophenol pagal Amaną; laktofenolis; Tirpalas, kuriame yra 15% dimetil sulfoksido ir vandens. Geri rezultatai gaunami po nagų plokštelių apšvietimu į 5% tirpalo CON 24 valandas, šildymas šiuo atveju nereikia.

Mikroskopiniai tyrimai gaminami įprastiniame laboratoriniame mikroskopoje be panardinimo.

Mikroskopo kondensatorius turi būti praleistas, diafragma yra susiaurinta. Pradžioje vaistas randamas ant stiklo su nedideliu padidėjimu (40x), vėlesnis tyrimas yra pagamintas su didesniu padidėjimu (100x);

išsamiai, vaistas yra tiriamas su 400x padidėjimu. Norint padidinti analizės patikimumą ir išvengti klaidingų teigiamų rezultatų, būtina ištirti keletą vaistų.

Klaidos mikroskopinės diagnostikos grybų gali atsirasti dėl abiejų defektų, skirtų narkotikų paruošimui ir nepakankamam laboratorijos eksperimentui.

Gamybos defektai pirmiausia yra prijungti:
su vaisto perkaitimo, kuris gali sukelti šarmų kristalų praradimą, plaukų sunaikinimą ir švelnų grūduoto skilimo patologinėje medžiagoje.

Linijinė pailgos sklandų šarmų kristalų linijinė vieta yra labai panaši į septinės grybelio siūlus net ant švarios stiklo be patologinės medžiagos.

Diferenciniai diagnostiniai požymiai yra išskirtinis monotonija kristalų, jų stiklinio skaidrumo, daugialypius kraštus ir neatskiriamas vieno elemento sujungimas su kitu. Abejoški atvejais, rekomenduojama pridėti lašelį į narkotikų šiek tiek šildomas distiliuotas vanduo, kuris greitai ištirpsta šarmų kristalai.

Dėl grybelio elementų jis gali būti klaidingas:

- riebalų lašeliai,
- oro burbuliukai,
- medvilnės drabužių siūlai
- ir vadinamoji "mozaikos grybelis".

Odos lipidai, ląstelių ląstelių ir keratogialino grūdų, ypač teisingos formos, grūdai gali būti panašūs į atskirus grybų ginčus. Tačiau formų įvairovė ir, svarbiausia, dydis, iš vidaus struktūros formacijų (vakuštas, apvalkalas) nėra kalbama nuo grybelinių pobūdžio šių elementų. Lipidai taip pat gali patekti į vaistą, kai vartojate patologinę medžiagą su nepakankamai išgrynintu pažeidimu.

Oro burbuliukai gali būti panašūs į mielių ląstelių ginčus, tačiau skirtingai nei pastarieji jie yra apsuptas tankus tamsus apvalkalas, o net mažiausi oro burbuliukai visada yra daugiau nei grybų ląstelės.

Siūlai nuo kojinių, drabužių ir kt. Paprastai yra atskirai nuo patologinės medžiagos, jie visada yra daugiau brūkšnelių, šiurkštesnis ir ne pertvarkytas.

"Mozaikos grybelis" yra artefaktas, kuris įvyksta kristalizacijos procese (galbūt dėl \u200b\u200bcholesterolio kiekio). Jis turi akių ar kilpos formą, kurios kontūrai atitinka raginių svarstyklių ribas, skirtingai nuo grybelio siūlų, jis niekada peržengia epidermio ląstelių sienų.

Kai kuriose laboratorijose, narkotikų apšvietimas mikroskopiniam tyrimui atlieka 15-30% tirpalo su tirpalu, kuriame 5 - 10% komercinių tamsių mėlynų dažų ("Parker" superchromo mėlynos spalvos rašalas).

Su šia spalva, GIF ir ginčai yra nudažyti mėlyna spalva.

Mikroskopijoje randama grybų ar surišančių ląstelių gijiniais gifais (1 pav.).

Taigi, mikroskopija daro išvadą tik apie grybelinį pobūdį infekcijos, bet ne apie grybų formos forma.

Žinoma, mikroskopinių tyrimų efektyvumas priklauso nuo laboratorijos darbuotojo kvalifikacijos.

Fig. 1. Mikroskopija laužas su nagais, kuriuos paveikė T. Rubrum. Gif yra matomi.

Kultūros tyrimai.

Vykdykite materialinę sėją Saburo trečiadienį, dažnai su antibiotikų priedais. Atsižvelgiant į dermatofitų infekcijų diagnozę, jis yra įpareigotas pridėti cikloheksimido į Saburo terpę, kuri yra didžiulis padidėjimas orlaivių teršalai krenta iš oro. Yra paruošta komercinė aplinka su priedais antibiotikų ir cikloheksimido. Reikėtų nepamiršti, kad daugelis pelėsių grybų - ne darbuotojas ir kai kurie Candida tipai ne auga ant cikloheksimido terpėje, todėl rekomenduojama sėti Saburo trečiadienį su cikloheksimidu ir trečiadienį be jo. Rūšių identifikavimas paprastai atliekamas su mikroskopiniu auginančios kultūros tyrimas arba atrankinė terpė (2-15 pav.).

Fig. 2. Kultūra grybų T. Rubrum, izoliuotas nuo paveiktų nagų. Gauta Saburo aplinkoje (kairėje) ir kukurūzų agare (dešinėje).

Fig. 3. Kultūra grybų T. Mentagrophytes var. "Interdigitale" pažymėta nuo paveiktų nagų. Gavo Saburo aplinkoje.

Fig. 4. Candida albicans grybų kultūra. Gavo Saburo aplinkoje.

Fig. 5. Kultūra Torulopsis glabrata grybų izoliuotas nuo paveiktų nagų. Gavo Saburo aplinkoje.

Fig. 6. Grybų kultūra yra ulokladium sp. Išryškinta nuo paveiktų nagų.

Fig. 7. Mikrofologija Acremonium sp. Pasirinkta iš nukentėjusių nagų.

Fig. 8. Mikromorfologija Fusarium sp. Apsilankė nuo paveiktų nagų.

Fig. 9. Mikromorfologija Scopulariopsis sp. Pasirinkta iš nukentėjusių nagų.

Fig. 10. Candida albicans mikromorfologija, izoliuota nuo paveiktų nagų.

Fig. 11. Mikromorfologija Altemaria sp. Izoliuotas nuo paveiktų nagų.

Fig. 12. Mikrofologija Aspergillus sp. Izoliuotas nuo paveiktų nagų.

Fig. 13. ulokladiumo SP mikromorfologija, izoliuota nuo paveiktų nagų.

Fig. 14. Mikromorfologija chaetomium sp. Izoliuoti nuo paveiktų nagų.

15 pav. Dermatofyt identifikavimo mitybos skydelis (kairė - kultūra t rubrum, dešinė - t mentagrophytes var. Mterdigitale).

Iš kairės į dešinę: Saburo, Mackener trečiadienį, Kornsense, kukurūzų AAR trečiadienį

Pažymėtina, kad kai kurie pelėsių grybai, įskaitant dermatofitų, lėtai auga kultūroje, per 2-3 savaites.

Net ir su visomis surinkimo medžiagos taisyklių, su geros įrangos laboratorijos ir aukštos kvalifikacijos jos darbuotojų, teigiamų rezultatų kultūros tyrimų skaičius yra labai mažas.

Pasak užsienio literatūros, teigiamų tyrimų procentas neviršija 50.
Teigiamų rezultatų procentinė dalis geriausių vidaus laboratorijų vos pasiekia 30.

Taigi 2 iš kas 3 onichomikozės atvejai neįmanoma nustatyti jo etiologijos.

Luminescencinė tyrimas

1925 m. Margaret ir Deveze nustatė, kad kai kurie dermatofitų plaukai sukelia būdingą švytėjimą ultravioletiniuose spinduliuose, praleistuose per filtrą. Stiklas BYDA susideda iš bario sulfato, yra apie 9% nikelio oksido; Jis praleidžia spindulius su 365 nm ilgiu. Įvairūs prietaisai gali būti naudojami kaip ultravioletinių spindulių šaltinis. Šviesos pobūdis neabejotinai nėra įdiegtas. Plaukai ir toliau šviečia po grybų mirties ir bandant išgauti fluorescencinę medžiagą su karštu vandeniu arba šaltu natrio bromido tirpalu. Šviesos intensyvumas ir pobūdis priklauso nuo tirpalo pH. Manoma, kad fluorescencinė medžiaga pasirodo sąveikos tarp grybų ir augančių plaukų procese.

Švietimas ultravioletiniuose spinduliuose, perduodamiems per medienos filtrą, yra būdingas tik plaukams, kuriuos paveikė Mikroauro genties grybai (M. Canis, M. Audouinii, M. Ferrugineum, M. Distorilum, kartais M. Gypsumu ir M. Nanum), \\ t taip pat trichofyton schonleinii. Mikrezorumui suteikiami plaukai, ypač M. Canis ir M. Audouinii, duokite ryškiausią švytėjimą; Plaukai, kuriuos paveikė T. Schonleinii, turi silpnų fluorescenciją.

Šviesa pastebima tik plaukuose, kuriuos visiškai paveikė grybai. Jis gali būti ne šviežių pažeidimų židinių. Tokiais atvejais būtina pašalinti plaukus nuo regioninės, aktyviausios zonos, o švytėjimas gali būti aptiktas šaknies dalies plaukų.

LUMINESCENT metodas gali būti naudojamas tiek diagnozuoti ir kontroliuoti gydymo efektyvumą atskirų pacientų ir epidemiologinių dėmesio. Kompaktiški mobilieji įrenginiai yra patogūs, kad būtų galima apklausti mokyklų, vaikų darželių ir kt.

Luminescencinė tyrimas turi būti gaminamas tamsoje patalpoje, pažeistos židiniai turi būti iš anksto valomi nuo plutos, tepalo liekanų ir kt. Šios ligos pažeidimų židiniai turi rausvą geltoną arba rudą švytėjimą. Tačiau šis švytėjimas nėra griežtai specifinis, nes jis gali būti pastebėtas esant pleiskanui ant galvos odos ir netgi sveikų žmonių plaukų folikulų burnos ant veido ir viršutinės kūno dalies . Atitinkami plaukai, nustatyti su luminescencinio metodo pagalba turi būti atliekamas mikroskopinis tyrimas.

Imunologiniai ir biologiniai tyrimai

Imunologiniai tyrimų metodai naudojami siekiant nustatyti specifinį grybelinių ligų organizmo ir serologinės diagnostikos restruktūrizavimą. Norint nustatyti konkrečius serumo antikūnus, atliekamos šios serologinės reakcijos: agliutinacija, krituliai, papildo privalomą, imunofluorescenciją su atitinkamais antigenais.

Alerginė paciento kūno būklė yra aptinkama naudojant alerginius odos mėginius. Alergenai taikomi skaidriam odai ant kirtiklio arba trina į odą ant Moro, intraderminiu manta, taip pat injekcija į odą. Su šių mėginių pagalba alerginės reakcijos tiek tiesioginio ir sulėtėjimo tipo yra atskleidžiami, todėl galima įvertinti humoralinį ir ląstelių imunitetą.

Norint nustatyti konkretų limfocitų jautrumą, bazofilų, aglomeracijos ir pakeitimo reakcijas, sprogimo transformacijos bandymą, makrofagų migracijos slopinimą ir kt.

Serologinių rezultatų palyginimas ir alerginės reakcijos Pasirodama, kad yra naudinga tiek diagnozei, tiek ir mikozių srauto prognozei.

Biologinis metodas. Naudojamas laboratorinei diagnostikai giliai ir ypač pavojingų myczes. Remiantis gyvūnų užkrečiant patologinę medžiagą iš paciento ar kultūros grybelio pagal tyrimą. Atliekami specialiose laboratorijose.

Histologinis tyrimas

Mikrosidijos odos histologija dėl dermatofitų

PATOMORFOLOGINIAI POKYČIŲ POKYČIAI yra dėl grybų įvedimo į epidermio, plaukų ir nagų ragų sluoksnį ir atsako uždegiminę odos reakciją, kuri gali būti ūmaus, subakuto ar lėtinio. Diagnozei galima apsvarstyti tik tuo atveju, jei grybų elementai aptinkami histologiniais preparatuose. Šiuo tikslu naudojamas įvairių histologinės spalvos, labiausiai informatyvus yra periodinė rūgšties reakcija (PAS), kuri leidžia identifikuoti polisacharidus, kurie yra prieinami celiuliozėje ir chitine ląstelių sienelės dauguma dermatofitų (spalva Chif ir jo pakeitimo). Taip pat galite naudoti sulfatizacijos reakcijas ir histologinių skyrių impregnavimą su sidabru [Khmelnitsky O. K., 1973; Lewer W. F. ir Schaumburg-Lewerl., 1983].

Epidermio ragų sluoksnio grybai, net naudojant specialias spalvas, yra aptinkamas nedideliu kiekiu kaip grybų ir ginčų siūlai. Retais atvejais, kai pažeidimuose yra daug grybų, jie gali būti aptikta skyriuose, nudažyti hemotoksilinu-eozinu, švelnių bazofilų struktūrų forma ragų sluoksnyje.

Uždegiminiai pokyčiai epidermyje gali būti skirtingi: nuo nereikšmingų viduje ir ekstraląstelinių patinimas ląstelių ryškus spongiozė. Sprongiozė paprastai vystosi nustatant sustojimo ir šepečių kopijų distertinius variantus, kliniškai, šiais atvejais, yra pažymėti burbuliukai. Šios reakcijos priežastis paprastai yra T. Mentagrophytes var. Interdigitale. Kartais epidermyje yra ryški hiperkeratozė, kuri dažniausiai stebima micozei dėl T. Rubrumo.

Dermos histologiniai pokyčiai yra nespecifiniai ir atitinka ūminį, subakutinį ir lėtinį uždegimą.

Su sklandžia oda su sklandžia oda, kurią sukelia T. Rubrum, grybai kartais atskleidžiami neliečiami plaukai ir plaukų folikulai. Uždegiminis atsakas vystosi aplink folikulus, kurie įvedant užtvanką, grybai gali įsigyti granuliacinio charakterio. Centrinė infiltracijos dalis šiais atvejais gali būti patiekiami su sodinimu ir nekroze, o periferinė susideda iš limfocitų, histocitų, epitelioidų ir daugialypių milžiniškų ląstelių, kuriose kartais aptinkami grybų ginčai. Šalies dydis čia pasiekia 6 μm skersmens, plaukuose paprastai neviršija 2 mikronų.

Su infiltraciniu siurbimo formu tirpia galvos odos ir barzdos augimo ir ūsai lauką, grybų elementai randami plaukų folikuluose, viduje ir aplink plaukus. Plaukuose jie yra apibrėžti tik virš keratinizacijos pradžios (maždaug 30 mikronų lygiu). DERMIS atkreipia dėmesį į įvairių intensyvumo uždegiminį atsaką, ryškiausias Kerion Celsii. Ūminio pūlingo reakcijos į infiltrato sudėtį, daug neutrofilinių leukocitų pažymima, grybų elementai šiuo atveju gali visiškai išnykti. Atsižvelgiant į lėtinį proceso srautą, infiltratas gali įsigyti granulomatinį charakterį, jame rodomi kelių pagrindinių milžiniškų ląstelių. Norėdami patvirtinti diagnozę nesant grybų infiltrate, imunofluorescencinės spalvos metodai gali būti naudojami. Šiems tikslams viruso paženklintas fluorescinas naudojamas T. Mentagropfitai, kurie leidžia aptikti grybų antigenus plaukuose ir peripolicine infiltrate.

Infiltracinės vertingos odos reakcijos formavimas Madp (Kerion Celsii) ir barzdos ir ūsų augimo plotas, dėl grybų M. Sanis, T. Tonsurans ir T. Verrucosum, yra pasireiškimas imunologinis atsakas. Tai patvirtina:

1. Pažeidimo į spontanišką rezoliuciją polinkį.

2. Grybų elementų trūkumas su labai ryškiu uždegiminės reakcijos iš odos su mikozė sukelia T. Verrucosum (Faviforme) ir T. Tonsurans.

3. Nuolatinis teigiama reakcija Atsakydama į intradermal vartojimą Tricooofin su infiltracinių-vertingų formų Mikosa, kurią sukelia zoologijos sodas tricophids (pavyzdžiui, T. tonsurans) ir neigiami - su paviršiaus metodais, kuriuos sukelia tos pačios T. tonsurans.

Su favu į ragų sluoksnį epidermio, daugybė miniačių ir vienišų grybų sporų yra rasti. Scounula yra atstovaujama eksudato, spidieratotines ląsteles epidermio, ląstelių uždegiminės infiltrato, taip pat erkių sriegių ir grybų sporų, kurie yra daugiausia periferinėje zonoje. Aktyvioje ligos etape dermos aplink degeneracinius plaukų folikulus, yra ryškus uždegiminė infiltracija, kurioje yra daugialypės milžiniškos ir plazmos ląstelės. Senajame pažeidimų židinyje trūksta plaukų ir riebalinių liaukų, yra fenomenų firozės.

Odos ir gleivinės, kurią sukelia mielės panašūs grybai, mikaų histologija

Odos ir gleivinės kandida, Candida genties grybai randami epidermio ragų sluoksnyje arba gleivinės epitelio paviršiaus sluoksniuose. Grybų elementai paprastai yra maži, jie yra gerai nudažyti su PAS ramybe arba grame; Pateikta septinės šakotuvo miltelių siūlai, 2-4 μm dydžio skersmens arba ovalo formos ginčuose, 3 - 5 μm skersmens. Diagnostinė vertė yra Mursijos pelėsių aptikimas.

Su histologiniu tyrimu lėtinio granulomatinio kandidozės odos ir gleivinės, grybų elementai taip pat pageidautina rasti ragų sluoksnyje epidermio ar labiausiai viršutiniai skyriai Gleivinės epitelio, bet kartais lupimo sluoksniu, plaukų viduje ir derme. Taip pat yra ryški hiperkeratozė ir papillomatozės; Dermyje - stora uždegiminė infiltracija, susidedanti iš limfoidinių ląstelių, neutrofilų, plazmos ir daugialypių milžiniškų ląstelių. Infiltruoti gali plisti į poodinį riebalinį audinį.

Su epidermio dubuo, daug grybų elementų, esančių švelnių bazofilų struktūrų, kurios yra aiškiai matomos net su hemotoksilino-eozino spalva, yra rasti raginyje. Grybai pateikiami su siūlais ir ginčais.

Svarbiausia hebulencijos forma, svirtis stebima raganos masės ir uždegiminės infiltrato ląstelių kaupimasis išplėstos plaukų folikulų burnos. Uždegiminė infiltracija taip pat pažymima aplink folikulus. Su PAS reakcija, sferinės arba ovalios sporos grybų, matavimo 2-4 μm skersmens, randama viduje plaukų folikulų burną, o kartais perifollikulinės infiltrate. Mielės niekada nenustatyta.

Odos pigmentacijos pažeidimas pacientams, sergantiems nešildomais atvejais, atsiradus dėl gebėjimų dėl pityrosporum grybų su medžiaga, kuri slopina pigmento formavimo procesą epidermyje. Elektronų mikroskopinis tyrimas odos biopsijų su hipocignitued svetainėse parodė, kad labai mažos melanocitai yra suformuoti melanocitais, kurie negali įsiskverbti į keratinocitus. Be hiperpigmentuotų sričių odos, priešingai, melanosomai yra dideli ir turi daug melanino.

Pagrindinis ditiologinės laboratorinės diagnostikos diagnostikos tirpiklius iki šiol, klasikiniai metodai ir toliau turi būti tęsiamas, įskaitant materialinę mikroskopiją, iš grynosios kultūros patogeno pasirinkimas po jo identifikavimo. Imunologiniai diagnostiniai metodai turi pagalbinę vertę. Jie naudojami norint nustatyti svarbiausius patogenus: patogeninius dimorfinius grybus, taip pat Cryptococmoczės, kandidozės ir aspergillezės sukėlėjams. Gene atstovavimo metodai (polimerazės grandinės reakcija) taip pat turi ribotą naudojimą dėl nepakankamo specifiškumo, tačiau daugiausia naudojami gilių ir oportunistinių mycozių diagnozę.

Tyrimo su laboratorine diagnostika mikozių, priklausomai nuo ligos formos, gali būti: oda ir jos priedai (plaukai, nagai), atskirtos žaizdos ir fistuls, skreplių, kraujo, alkoholio ir šlapimo, audinių biopsija. Patologinės medžiagos paėmimo teisingumą daugiausia lemia tolesnių laboratorinių tyrimų efektyvumas. Po odos pažeidimų medžiaga yra atrenkama dažniausiai nubraižyto arba naudojant lipnią juostą (daugiausia paviršiaus formas) prieš šviežių, bet visiškai išvystytus židinius į periferiją, kur yra gyvybingiausi patogenai.

Kai aptinkami dermatofty grybai, plaukai yra labai informatyvūs, nes plaukų pažeidimo pobūdis leidžia nustatyti patogeną. Pažeidimo dėmesio apibrėžtis kai kuriais atvejais padeda naudoti medienos lempą. Poveikio plaukai kartu su svarstyklėmis išgaunama epiliatoriais. Lėtiniu "Black Trico" triotietu plaukai pašalinami iš odos su išankstinio mokėjimo adata.

Nagai yra parinkti visame sluoksniuose, išjunkite aštrią skalpelį arba žirkles. Efektyvesnis pasirinkimas naudojant dantų šepetėlį. Su candidalitu pažeidimais medžiaga yra pasirinkta naudojant taikymo sritį nuo nagų voleliu. Pasirinkta medžiaga pristatoma į tamsių popierinių maišelių laboratorijoje, kad būtų išvengta džiovinimo ir užteršimo nuo pašalinių mikrofloros. Medžiaga, kurioje yra PUS, tiekiamas steriliose krikštynose ar Petri lėkštelėse. Sputumas yra pasirinktas steriliais patiekalais. Šlapias tyrimas turėtų būti atliekamas ne vėliau kaip prieš 2 valandas po surinkimo. Pailgindami tyrimo išplėtimą, mėginiai turi būti laikomi šaldytuve + 4 ° C temperatūroje, gali atsirasti diagnostikos klaidų, susijusių su pseudomyceliacinių mielių ląstelių formų išvaizda.

Kraujo ir stuburo skystis atrenkami laikantis aseptinių taisyklių. Sėjantis kraujas atliekamas skystoje Sabul laikmenoje. Norėdami pašalinti kraujo mėginių užterštumą, jų pakartotiniai tyrimai atliekami. Stuburo skystis Centrifuguojama, o nuosėdos yra naudojamos mikroskopiniams ir sėjimui.

Šlapimas pasirenkamas ryte steriliais patiekalais, o būtina išvengti mikrofloros odos medžiagos taršos. Sėjamoji šlapimas atliekamas naudojant kiekybinius sėjos metodus.

Diagnozei diagnozuojant diagnozę, preparatai naudojami tiek iš vietinės medžiagos ir dažytos. Našalingų narkotikų tyrime tanki medžiaga yra iš anksto apšviesta (makerystė) 10-30% con (tirpalai sulfoksido dimetilo) ir tada mikroskopinis naudojant "susmulkintą lašą" metodą. Norėdami perduoti kontrastą, preparatai kaltinami su vandeniniu metileno mėlynos tirpalu.

Fiksuotų tepalų spalva atliekama įvairiais būdais: pagal gramą, metileno mėlyna, pasak Romanovskio - sporto salės. Paskutinis metodas leidžia matyti mažas mielių ląstelių ir fagocitozės žingsnius. "Cryptococki" naudoja spalvų rašalą, tapybą "Mudskamine" sougeit. Melanino turintys grybai (tamsiai spalvos), pavyzdžiui, Cladophialophora Bandana., dažomas masės - fontanas (melanino dažymas, kuris yra ląstelių sienelės dalis). Fluorescenciniai serumai naudojami diagnozuojant gilesnius mikaozės patogenus, dermatophyatophyte patogenus, autentiškus Candida.

Švaraus patogeno kultūros atranka leidžia nustatyti grybų bendrą ir rūšių priklausomybę, išnagrinėti savo savybes ir jautrumą antimikrobiniams vaistams. Dėl paskirstymo ir identifikavimo grybų, tankios ir skystos maistinių medžiagų laikmenos yra naudojamos, Suslo-agar. Šios žiniasklaidos užtikrina labiausiai patogeniškų ir sąlyginai patogeniškų grybų augimą. Be to, Saburo aplinka (8.2 pav.) Skatina pigmento formavimo procesus grybuose, kurie nustatant.

Antibiotikai pridedami prie bakterijų teršalų augimo terpėje: kairėomiketinu, streptomicinu, penicilinu, tetraciklinu. Norėdami izoliuoti įnoringas patogeniškas grybų, naudojamos terpės, praturtintos kraujo ir širdies ir kraujagyslių ekstraktu. Specialios laikmenos naudojamos grybų auginimui ir identifikavimui: Cape trečiadienį - už Conidium formavimui, kai identifikuojant pelėsių grybus, bulvių (bulvių morkų) agarą, ryžių agarą - nustatyti augimo tipus ir gauti chlamidosporę, kai nustatomi genties grybai Candida., morkų (daržovių) agaras - gauti tipiškus kultūros grybų kolonijas Trichophyton Schonlei, Pinigų trečiadienis - pabrėžti pigmentų formavimo grybus. Diferencinė diagnostika naudojama, pavyzdžiui, nustatyti C. albicans - Chromogeninės laikmenos ar terpės, kad būtų galima nustatyti grybelio fosfolifazės aktyvumą.

Laiko inkubacija grybų yra nuo kelių dienų iki 1 mėnesio ar daugiau. Su įtariami patogeniniai dimorfiniai grybai, skirti neigiamam atsakymui išduoti, auginimas atliekamas 8 savaites.

Žiniasklaidos atliekamos sėjamosios, išsiliejo ant bandomųjų vamzdžių, butelių ir Petri patiekalų. Materialiniai pasėliai antitų grybų atlieka vienu metu keliuose vamzdeliuose su terpe. Įtrintos medžiagos, įtartinos ant pelėsių grybų (šlapias), sėjami 3 taškuose ir inkubuojami 28 ir 37 ° C temperatūroje. Išspręsti užteršimo iš medžiagos tvoroje, kontrolės sistemų ore dėl pelėsių grybų išlaikymo laboratorijos ir kamerų patalpose, kuriose yra pacientai yra.

Kai auginami grybai mikratinėje laboratorijoje, saugumo priemonės yra panašios į tuos bakteriologinių laboratorijų. Darbas su pelėsių grybais ir mycotoksinais, kad būtų išvengta alergys, personalas atlieka bagažuotus kambariuose nuo marlės tvarsčių arba stalo dėžės su ištraukikliu. Darbas su II grupei patogeniškumo grupei (patogeniniai dimorfiniai grybai) yra įmanoma tik specializuotose laboratorijose.

Grybų tipų identifikavimas atliekamas remiantis kultūros, morfologinių ir kitų ženklų kompleksu. Pirmasis apima kolonijos morfologiją, jos tapybą ir auginimo dydį specialioje aplinkoje, regiono struktūra ir centras, paviršiaus pobūdis, reprodukcinių organų buvimas ir pobūdis iki antrojo bruožų Mikroskopinė mikroskopinė struktūra, struktūra, forma ir dydis reprodukcinių organų - indion sėdynės, Conidium, Chlamyndorės, Arthrondore ir kt.

Grybai sudaro įvairius kolonijų tipus tankių maistinių medžiagų. Mokslininkai iš Venterher (JAV) instituto, atsižvelgiant į grybų gebėjimą skirti pigmentų medžiagas trečiadienį, sukūrė "Naujųjų Metų Kalėdų eglutė" maistinių medžiagų terpėje (8.3 pav.).

Fig. 8.3. "Naujųjų metų medis" nuo grybų (viršuje: Talaromyces stiperatus.; Mediena. \\ T Aspergillus nidulans;dekoracijos: Penicillium Marneffei; kelmas: Aspergillus terreus)

Enzymatic ir asimiliacinės kultūros turi labai svarbu Nustatant mieles (mielės panašios grybų). Šiuo metu taikomos komercinės bandymo sistemos, skirtos nustatyti bendrų grybų - priežastinių agentų: BBL MyCotube, API 20C BIO Merieux ir kt.