Analiza IFA. IFA: Kako je analiza? Stane

V laboratoriju Hemostasis MZHTS uporabljajo novo, zelo občutljivo metodo ELISA - ELISA (encim vezan imunosorbent test), heterogeno trdno fazno imunsko analizo. Med študijo se določi prisotnost protiteles v pacientovi krvi na patogene različnih bolezni.

Stroški analize IFA *


Za kaj je analiza imunoasay

ELISA se uporablja na številnih področjih medicine. Pri ljudeh s koronarno boleznijo srca, ateroskleroze in hipertenzije, se protitelesa zaznajo na beljakovine sistema Hemostasis - trombina, a2 makroglobulin in antitrombin 3, kot tudi peptidnimi biološkimi sistemi koagulacije - ANGEOTENZINE 2 in BRADYIKININ.

ELISA je dokazala svojo učinkovitost pri prenatalni diagnostiki in pri določanju plodnosti je preskus AFP (diagnostika hrbtenice, trisomija iz plod), testi za steroidne hormone Estadiol, estiriol, progesteron.

Več zapletov nosečnosti, neplodnosti in tromboflebitis povzroča hudo avtoimunsko bolezen - antifosfolipidni sindrom. Diagnoza AFS v medicinski ženski center se izvaja tudi z metodo encimskega imunoasay: definira protitelesa za kardiolipin, b2-glikoprotein, protrombin in priključek 5.

Seznam razpoložljivih diagnostičnih tehnik v zadnjih desetletjih se hitro širi, diagnostiki poskušajo združiti koristi vseh prejšnjih analiz v novih metodah, ki se znebijo vseh njihovih nekdanjih pomanjkljivosti.

V zadnjem času je imununimenska analiza vse bolj na seznamu diagnostičnih postopkov - sodoben in dokaj nov test, ki je znano običajni osebi, ki ni povezana z zdravilom. Kljub temu, ta tehnika hitro dopolnjuje vrste svojih privržencev med usposobljeno medicinsko osebje. Kaj predstavlja in v kakšnih primerih je treba uporabiti, lahko poskusite ugotoviti, seznaniti se s svojimi značilnostmi in glavne značilnosti.

Študija imunoasay je tehniko orodja-laboratorij, ki temelji na molekularni reakciji antigena protitelesa, ki omogoča odkrivanje posebnih proteinov v bioloških materialih (vzorci za raziskave). Takšne beljakovine so lahko encimi, različne mikroorganizme (virusi, bakterije, glive), najpreprostejše itd.

Po odprtju metode je dobil ime testa ELISA, ki ni povezan z imenom odkritij, in je kratica polno ime v angleščini - encimsko vezan imunosorbent test. Zdravniki po vsem svetu uporabljajo to ime, nekateri zdravniki v rusko-govornih državah, so prav tako imenovani ta vrsta raziskav.

Glavno načelo metode je molekularna reakcija "antigensko protitelo".

Antigen je vsaka tuja molekula, ki je padla v človeško telo v mikrobovju vzročnega dejanja bolezni. Antigeni so praviloma beljakovinske molekule. Poleg mikroorganizmov je takšen "neznanec" lahko nekdo drug celice, ki se ne ujemajo s skupino ali faktorjem Rhesus.

V odgovor na zadetek takega antigena v telesu se sproži imunski odziv, ki je usmerjen na zaščito pred katerimi koli drugimi molekulami. To se zgodi zaradi sinteze posebnih zastopnikov imunski sistem - protitelesa (imunoglobulini). Vsako protitelo je primerno samo za določen antigen in nevtralizira patogeni "neznanec", ki se mu obrne v enem kompleksu. To je proces takšnega vezanja in imenovan antigenska protiteloska reakcija.

Tipi protitelesa

Vsa protitelesa (imunoglobulini) so razdeljena na 5 vrst, odvisno od tega, na kateri stopnji imunskega odziva se prikažejo:

Ravni imunoglobulinov IgG, IGM in IGA so najpogosteje pomembne za diagnostiko IFA. V skladu z njihovimi titovi, lahko ugotovite, če je oseba, ki je imela bolezen pred ali okuženo v zadnjem času, ne glede na to, ali je razvil imuniteto ali njegovega telesa brez obrambe pred patologijo.

Prednosti in slabosti encimov

Trenutno je ELISA ena najbolj natančnih in občutljivih metod. Pozdravljajo jih strokovnjaki na različnih področjih medicine in še naprej širi obseg uporabe.

Koristi metode

  • Visoka natančnost pridobljenih podatkov.
  • Občutljivost (vam omogoča, da zaznate potrebno snov tudi z najmanjšo prisotnostjo patogena v vzorcu).
  • Možnost diagnoze v prvih dneh bolezni ali v inkubacijskem obdobju.
  • Hitrost pridobivanja podatkov v primerjavi z drugimi metodami podobne natančnosti.
  • Visoka avtomatizacija procesa in minimalne človeške udeležbe, ki zmanjšuje napako umetnika.
  • Pridobivanje podatkov na stopnji patološkega procesa in učinkovitosti izbrane terapije.
  • Neboleč in nizka invazivnost pri izbiri materiala.

Slabosti metode

  • V večini primerov vam omogoča, da določite odziv telesa na patogeno sredstvo, ne pa najbolj vzročno sredstvo.
  • Pred študijo je treba nameravana bolezen natančno znana kot test zelo specifičen.
  • Verjetnost napačnih kazalnikov, ki jih povzročajo tehnični trenutki, ki so jih prejeli zdravila, hkratno prisotnost več kroničnih bolezni ali kršitev presnovnih procesov v bolnikovem telesu.
  • Razlaga rezultatov bi morala storiti le visoko usposobljeni strokovnjak, saj je zaradi razlage pridobljenih podatkov potrebno za lastno posebno usposabljanje in veliko mejo zdravstvenega znanja na določenem območju.
  • ELISA je precej redka analiza, zato je to storjeno daleč od vseh diagnostičnih laboratorijev.
  • Metoda je precej draga, saj bi morala poleg reagentov v laboratoriju biti draga številna oprema in vzorci antigenov, proizvedenih v posebnih ustanovah.

V katerih primerih uporabljajo analizo imunoasay

Popoln seznam indikacij za imenovanje študije imunoferjenje je zelo širok, vključuje skoraj vse industrije medicine.

Najpogosteje se IFA uporablja za takšne namene:

  • identifikacija nalezljivih bolezni;
  • diagnoza zveznih bolezni;
  • opredelitev imunskega statusa ali posameznih avtoimunskih bolezni;
  • identifikacija moderjev;
  • opredelitev hormonov.

V primeru nalezljivih in virusnih bolezni vam omogoča, da ugotovite naslednje patologije:

Poleg tega vam ELFA omogoča hitro in učinkovito določitev stanja infarkta, oceniti reprodukcijski potencial telesa, za identifikacijo alergij, njegovega vira itd.

Tehnika Imunoasima se uporablja za izvajanje kliničnih študij med razvojem novih zdravilne pripravke In pri ocenjevanju njihovega vpliva na človeško telo.

Vrste vzorcev in metod njihovega izbora za raziskave

Najpogosteje preskusni material za analizo imunoferja služi krvi, ki je vzeta iz pacientove komočne vene. Vzorčenje se izvaja na prazen želodec, predvsem zjutraj. Po izbiri krvi se ločijo in odstranijo tiste enotne celice, ki vplivajo na raziskave, kar zapušča samo serum.

Pri diagnosticiranju okužb urinske, madežev iz sluznice genitalij, sluz iz sečnice ali materničnega vratu, vzorci iz rektuma, vzorci z erozijo ali razjedami na območju dimelj in drugih delov telesa, ki pogosto postajajo materiali. Smare lahko vzamejo in z ustne votlinekot tudi z nazopharynx.

Včasih se v porodniški in ginekološki praksi med nosečnostjo uporablja imunOassay, da se določi stanje vretena voda. V tem primeru vzorec postane amotična tekočina. Če želite to narediti, izberite majhno količino tekočine, punctures sadnega mehurčka z dolgimi iglo. Vse manipulacije izvajajo sterilno orodje za zmanjšanje možnih tveganj.

Pogosto material postane hrbtna ali serozna tekočina. To se dogaja na lokalni anesteziji, ki se vbrizga vbrizga.

Pojasnite, kateri tip materialov je potreben za encimskega imunoassay, specialist, ki usmerja raziskave. Pogosto se vzorci vzamejo na enkrat več vrst ali iz različnih krajev. Zdravnik, ki izda smer za to vrsto ankete, je treba objaviti tudi o pripravah na nastopavanje biomateriala.

Priprava na imununimalno analizo

Da bi povečali natančnost podatkov, pridobljenih po izpitu imunoasay, bi morala biti priprava na izbor materiala taka:

  • 10 dni pred študijo, izključite antibiotike, protivirusna in antimikotična zdravila;
  • med dnevom je treba izključiti alkoholne, kajenje in sprejem narkotičnih snovi;
  • v istem obdobju se je treba izogibati fizične prenapetost;
  • opozoriti strokovnjaka, ki je zapisal, o vseh zdravilih, ki jih bolnik sprejema;
  • v primeru nosečnosti ali domnevne nosečnosti obvestite svojega zdravnika.

Najbolje je, če bodo testiranje materialov izbrani zjutraj na prazen želodec.

Če diagnoza postavlja cilj, da določi stanje hormonskega ozadja, je pomembno, da se zagotovi samospomno stanje na predvečer in se izogibati živčni napetosti. Za ženske je pretok krvi v hormone jasno določen z obdobjem mesečnega cikla, ki ga bo zdravnik v času destinacije povedal.

2-3 dni pred izborom materiala, je treba izključiti ocvrte in maščobe iz menija, in pred analizo hepatitisa ne jedo agrumov in drugih sadja in zelenjave oranžne in rumene.

Dešifriranje rezultatov analize imunovke

Rezultat kvalitativne študije je običajno označen z znaki "+" (zaznano) ali "-" (ni zaznano).

Za prisotnost ali odsotnost nekaterih imunoglobulina se lahko takšni zaključki izvedejo:

  • JGM (-), JGG (-), JGA (-) - imuniteta bolezni je povsem odsotna (s takšno vrsto antigena, telo še ni naleteli);
  • JGM (-), JGG (+), JGA (-) - prej je prišlo do trka s tem antigenom ali s cepivom;
  • JGM (+), JGG (- / +), JGA (- / +) - Akutni patološki proces (najverjetneje primarno);
  • JGM (-), JGG (+/-), JGA (+/-) - Postopek kroničnega toka;
  • JGM (+), JGG (+), JGA (+) - Recurney;
  • JGM (-) - faza okrevanja.

Kvantitativne vrednosti nosijo večjo informacijsko obremenitev, vendar jih lahko samo udeleženec razlagati, na podlagi prejšnjega pričanja, starosti bolnika, norme za vsako specifično bolezen. Zato je nemogoče, da rezultate ocenijo neodvisno.

Koliko morate čakati na rezultate

Ta tehnika ima številne sorte, odvisno od tega, kar je določena do časa za prejemanje podatkov na roki. Povprečno trajanje diagnoze IFA je 4-6 ur, kar vam omogoča, da rezultate da naslednji dan.

Najdaljše metode traja do 10 dni, na primer v primeru okužbe s HIV.

Za akutna potreba Možno je uporabiti hitre tehnike, v katerih je odgovor dosežen po 1-2 urah.

Kjer lahko posredujete testiranje IFA

Ker je oprema za izvedbo te vrste diagnostike precej draga, se vsi laboratoriji ne morejo kupiti. Poleg tega imajo preskusi, ki vsebujejo posebne antigene, omejen rok uporabnosti (običajno približno 1 leto), zato potrebujejo konstantno posodobitev.

Iz teh razlogov, v državnih zdravstvenih ustanovah, IFA laboratorij še zdaleč ni vedno. Najpogosteje je treba obrniti na velike zasebne medicinske ali velike diagnostične centre.

Za raziskave IFA mora imeti laboratorij posebno licenco, osebje in laboratorij tehniki pa morajo opraviti posebno usposabljanje.

Najpogosteje, določen diagnostični center ali laboratorij priporoča zdravnika, ki vodi pacienta za raziskavo.

Stroški raziskav o imunofinanciranju

Cena je na ta študija Odvisna od regije države in ravni klinike, ki zagotavljajo storitev. V Moskvi se najnižja cena za opredelitev enega antigena začne od 700 rubljev. Če morate naenkrat razkriti več imunoglobulins, bo cena povzela.

V primeru nujne analize se stroški povečajo za 150-200 rubljev. Za vsak antigen.

Kljub precej visokim stroškom, imunskoasimenzionalna analiza vam omogoča, da se pacient preiskava kot informativen in hitro, kar zmanjšuje čas pred začetkom zdravljenja in omogoča hitro stabilizacijo stanja osebe.

Ta videoposnetek predstavlja film "Osnove evrane kmetovanja".

Z napredkom sodobne medicine je mogoče izvesti bolj poglobljeno diagnostiko pri sumih nekaterih patologij pri bolniku. Ena od informacijskih metod laboratorijske raziskave IFA je postala analiza, ki se izvaja z metodo ustrahovanja venske krvi. To pomeni, da nič ne spremeni za bolnika. Vendar pa laboratorij IFA analizator vodi kompleksno tehniko za študij polarnega biomateriala. Kakšne so analize ELISA in kakšne so spremembe uporabe metode IFA kot diagnostične, razumemo spodnji material.

Kaj je analiza imunovke?

Proizvodnja protiteles sama izzovejo antigene, prodirajo človeško telo. Ob vstopu v "bitko" za zdravje telesa protitelesa, kot je bilo, so antigeni označeni, da pri preučevanju krvi in \u200b\u200bvidi laboratorijski asistent. To je v polarnem biomaterialu, lahko sledite ne le prisotnosti okužbe, ampak tudi svoje sledi po tem, ko je telo v celoti izterjano.


Tako lahko dodelitev imunoferjevega krvnega testa pacientu, se udeležuje zdravnik lahko spremlja hitrost okužbe, stopnjo napredovanja ali prepoznavanje prisotnosti imunitete eni ali drugi okužbi.

Postopek diagnostike IFA izgleda:

  • BLICD Vemonska kri v laboratoriju v stanju krvnega seruma;
  • Laboratorij se nato uporablja poseben pladenj s celicami, od katerih ima vsaka vse potrebne antigene. Dovolj je, da se spustimo v vsako krvo v serumu in sledite imunoglobulinski reakciji (protitelesa) na antigene. Prisotnost "potrebne" reakcije kaže spremembo barve materiala v študiji. V prihodnosti laboratorij upravlja optično gostoto preiskovanega medija.
  • Ascaridoza in enterobiaza (Ascaris in ostrina);
  • Trihinoza;
  • Opistorhoz v akutnih in kroničnih oblikah;
  • Giardiasis;
  • Amebiz;
  • Toksoplazmoza;
  • Leishmaniosis v kakršni koli obliki.

Pomembno: Imuno-imunimalna analiza je kakovostna in kvantitativna. V prvem primeru laboratorijski manifest samo potrjuje ali zavrača prisotnost iskanega krvi. V drugem primeru, kot rezultat analize, je njena koncentracija v bolnikovem telesu indicirana.

Slabosti metode

Z vsemi prednosti te metode diagnoze je vredno razumeti, da imunofermentalni krvni test ni način, da bi našli vzrok bolnikove bolezni, ampak le metoda potrditve zdravnika premediciranega diagnostika. In glede na dejstvo, da študija ni opremljena, jo je treba uporabiti z umom. Istočasno bi morali rezultati študije razlagati le usposobljenega strokovnjaka.


Dekodiranje rezultatov

Ko razstavimo okrajšavo IFA in kaj je Ustanovljeno, je vredno premakniti na razlago rezultatov. Pomembno je razumeti, da bo, če je bila analiza opravljena kvalitativna, bo rezultat le pozitiven ali negativen. To je diagnoza ali potrjuje sum zdravnika glede na določeno diagnozo ali jih zavrača. V tem primeru bodo simboli "+" ali "-" stojili v obliki.


Pomembno: negativni rezultat analize ne pomeni vedno odsotnosti okužbe. Dejstvo je, da se lahko protitelesa proti antigenom oblikujejo v 14 dneh po okužbi in je verjetno, da še niso oblikovane.

V primeru kvantitativne analize se tukaj določi vrsta protiteles, njihovo število in stopnjo aktivnosti. Zlasti s takšno diagnostiko se določijo protitelesa (imunoglobulini) IgG in IGM, ki se oblikujejo v različnih obdobjih napredovanja okužbe. Najpogostejše možnosti v tem primeru so:

  • Povišana IGM in popolna odsotnost IgG. Ta slika označuje nedavno okužbo in akutno fazo patologije.
  • Povečana aktivnost imunoglobulinov obeh vrst (IGM in IgG). Govori o dolgem in kroničnem toku infekcijskega procesa.
  • Aktivnost IgG in popolna odsotnost Igme. Okužba je bila pred vsaj šestimi meseci in zdaj je virus v dolgotrajni kronični fazi.
  • NE IGG in IGA protiteles. Rezultat ni definiran.
  • Ne IGM, IGA in IgG protitelesa. Označuje odsotnost imunitete določeni okužbi.
  • Dejavnost IgG, IgM in IGA protiteles govori o poslabšanju kroničnega procesa.

Poleg identifikacije vrst protiteles, laboratorijski asistent v posebnem razredu obrazca kaže in njihova količina za volumen krvi. Ne pozabite, da v zvezi s tem, kar je metoda ELISA, ne prekinjajte rezultatov sami. Rezultati, dobljeni s točnostjo, lahko razlagajo le zdravnika, odvisno od nameravane diagnoze, je zgrajena na podlagi klinična slika pri bolniku.

Kako študirati metodo IFA

Reakcijski mehanizem

Imununimalna analiza temelji na antigenov imunski odziv s protitelesom, in dodajanje encimska oznaka protiteles omogoča, da se upošteva rezultat reakcije antigena antigena z videzom encimske aktivnosti ali s spremembo njene ravni. V Z zlorabljenimi oblikami, reakcijski mehanizem se lahko predstavlja kot povečan način:

Prva reakcija se pojavi med IG (AB) in prečiščenim antigenom patogena (AG), pritrjena na površino imunološke tablete

Če želite identificirati nastale imunske komplekse, se izvede druga imunološka reakcija, v kateri obstaja nasprotni posebni IG kot antigen, in kot protitelo, ki je na njem - konjugat, ki je IG (AB) do ustreznega IG osebe , označeno z encim-peroksidazo (k)

Poleg tega se pojavi encimska reakcija, katalizirana z encimskim delom molekule konjugata. Obstaja brezbarvna snov - kromogen, ki se v potujoči reakciji oblikuje pobarvana snov. Intenzivnost barve v dobro opredeljenem na količini imunoglobulinah, ki jih vsebuje vzorec.

Štetje rezultatov

Izvajanje imunofinančne analize

Za serodiagnozo, 96 dobro polistirenske plošče, na stenah celic, katerih antigen je adsorbirana vnaprej. V serumu se v serumu vnese v celico tablete. Hkrati so nanj pritrjena homologna antigenska protitelesa. Ne smete odstraniti nobenih protiteles za pritrditev. Nato se v celice vnesejo protitelesa proti imunoglobulini (protitelesa) osebe, ki jih označuje encim. Če so bila izbrana protitelesa prisotna v serumu v študiji, bo na tej stopnji nastopal v vlogi antigenov, s katerimi se bodo odzvali označena protitelesa. Dodajanje po izpiranju kromogene snovi (barvilo) bo omogočilo reakcijo na razvoj obarvanja v celicah. Intenzivnost obarvanja hkrati je sorazmerna z količino encima, in posledično količino protiteles. Pri merjenju optične gostote (OP) tekočine v celici in primerjavo s kontrolnim vzorcem, koncentracijo koncentracije protiteles v enotah volumna se izračunajo. Pogosto se uporablja za izračun rezultatov v enotah optične gostote. Za vsak preskusni sistem obstajajo kazalniki rezultatov rezultatov in kazalnikov norme in patologije, na katerega je potrebno za navigacijo v razlagi rezultatov.

Katere okužbe lahko identificira metoda IFA

V bistvu, sodobna venereologija se uporablja za diagnosticiranje sifilis (v kompleksu z drugimi reakcijami), okužb s HIV, virusnim hepatitisom. To je omejena vrednost za diagnozo klosirane okužbe, citomegalovirus okužbe in drugih herpetnih okužb. Način IFA se uporablja tudi za Določite protitelesa pri različnih nalezljivih boleznih., Hormonska raven, avtonotilerji in različni označevalci raka.

Kako interpretirati rezultate IFA

Študija prisotnosti in ravni protiteles različnih razredov v ne-za primere pomaga določiti faze infekcijskega procesa.

Faza bolezni

Igm.

Iga.

IgG.

Osnovna faza
(2 tedna od okužbe)

Osnovna faza
(2,5 - 3 tedne od okužbe)

Osnovna faza
(3-4 tedne od okužbe)

Poslabšanje kronične faze
(2 tedna od začetka poslabšanja)

Kronična faza

Preteklosti (zdravilna okužba)

Okrevanje

zmanjšan titriter 2-4 krat po uspešnem zdravljenju

zmanjšanje titra je 4-8 krat po 1-1,5 mesecih po uspešnem zdravljenju

Negativen rezultat.

Na žalost, tako pomembna prednost ELISA, kot količinska opredelitev protiteles, ni pomembno v praktičnem delu - t.j. Ne vzpostavi natančno diagnozo in ne vpliva na odmerjanje in datume za namene drog.

Kakšna je vloga metode IFA pri diagnozi sifilisa

Metoda ELISA v diagnozi sifilis se je prvič uporabila leta 1975. V tem trenutku se pogosto uporablja za serološko diagnozo sifilis v Rusiji in se uporablja kot konfiguriranje testa na sifilis. Posebej se izvaja s proučevanjem. Poklicana skupna protitelesa na bled Treponam antigenov (IGM in IgG) Čeprav je v nekaterih primerih mogoče identificirati samo "zgodnje" m. Imferosna protitelesa v sifilisu postane pozitivna po 3 tednih od trenutka okužbe in ostaja dovolj pozitivna za dolgo časa Tudi po zdravljenju (včasih življenjska doba). Zato, kot preskus, ki potrjuje zdravilo Syfilis, IFA se ne uporablja. V večini primerov se izvede samo kvalitativna opredelitev IFA - t.j. Samo pozitiven ali negativen rezultat, čeprav je možna kvantitativna določitev.